"COLO 741 epithelioid cells人直腸癌細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。

MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞

L-Wnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞

D-283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞

細(xì)胞生長：貼壁

COLO 741 epithelioid cells人直腸癌細(xì)胞系

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時(shí)因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng)，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺(tái)上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細(xì)胞時(shí)，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至３７°C，并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長滿盤，則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

Fox/NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR751細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞

Plaepi 34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA PCa 2b細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞、CA922細(xì)胞

A-875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-433細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞

HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435S細(xì)胞、AC29細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞

HuH 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC812細(xì)胞、OE19細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞

細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

COLO 741 epithelioid cells人直腸癌細(xì)胞系

細(xì)胞生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書

培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。

BJAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 DM細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、tdott細(xì)胞

HCT116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat podocyte細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞

MDA-MB-435-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞

CMT.64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv.1.Lu細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞

HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞

578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME1細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞、HT 29細(xì)胞

SV40-MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細(xì)胞、G519細(xì)胞、149 PT細(xì)胞

OCI-AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU398細(xì)胞、16HBE細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞

H-295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-182細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞、UCH1細(xì)胞

MCF 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞

COLO 741 epithelioid cells人直腸癌細(xì)胞系

RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞

WEHI-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2170細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞、SW-900細(xì)胞

Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 354.T細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞

NCI-H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM6細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞

RAOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS62細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞、H-1355細(xì)胞

CCRF-CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞

CCRF-CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞

EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞

AD-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞

MC3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞

HB 611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #1846細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞、H2405細(xì)胞

HPAF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-2細(xì)胞、NCI-H1373細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞

Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞

BRL3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-164細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞

UWB1.289+BRCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 1細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞、SUM149細(xì)胞

B16F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞、NB1RGB細(xì)胞

J 111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2030細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞、L929細(xì)胞

CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞

451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞

Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97H細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞

RCCJF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-1細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞

A375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOUNH91細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞

Scott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞、SW1116細(xì)胞

SF 539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞

H-1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細(xì)胞、H1734細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞

ECC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116細(xì)胞、AM-38細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞

Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOMA細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞

RAT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 2細(xì)胞、Walker256細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞

LWnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549 ATCC細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞

MDA-MB-175-VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞、NB.4細(xì)胞

CALU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU1細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞、H1770細(xì)胞

RN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-4細(xì)胞、4T1細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞

NCI.H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1(ATCC)細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞

HS-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞

MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞

HCC0095細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ha Fe細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞

He La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細(xì)胞、EST50細(xì)胞、M210B4細(xì)胞

MFE280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞

MFE280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞

JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞、RC92A細(xì)胞

SF 126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/BL6細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞、SUM102細(xì)胞

MN-9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac6細(xì)胞、BT549細(xì)胞、H-2405細(xì)胞

H-1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細(xì)胞、ES2細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞

FU-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCl-H157細(xì)胞、MAD109細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞

HEK293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-7951細(xì)胞、H920細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞

Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 6細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞、LN-229細(xì)胞

FHL 124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C13細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞

TSCCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1-289細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞

U 937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAHY-926細(xì)胞、N1S1細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞

SW 579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN-1細(xì)胞、WM 115細(xì)胞、EPC細(xì)胞

KYSE-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE1細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞、BTT739細(xì)胞

COLO 741 epithelioid cells人直腸癌細(xì)胞系

HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞

16-HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細(xì)胞、RCF細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞

Earle's L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGECs細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞

MDA-MB-435-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞

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