"HuP-T3 epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類(lèi)型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類(lèi)型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類(lèi)型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
HTR-8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV-90細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞、PC-12細(xì)胞
ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞
KYSE 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2108細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
HuP-T3 epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類(lèi)、血清種類(lèi)和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類(lèi)，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類(lèi)培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)和濃度，于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
GM07404A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU407細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞
COLO678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30 OHK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞、H9細(xì)胞
HSAS4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2058細(xì)胞、C8166細(xì)胞、MDA-MB-134VI細(xì)胞
H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HuP-T3 epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買(mǎi)的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
HeLa-S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞、SW 579細(xì)胞
CL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、HL7702細(xì)胞
MBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-16細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞
EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞
Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞
R D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 120細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞
Panc08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-1E8細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞
F81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-90細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞、BHK21細(xì)胞
SNK6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B1細(xì)胞、H69C細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞
HuP-T3 epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系
PLC PRF 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RLE-6TN細(xì)胞、U-2932細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞
KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞
MC3T3-E1(C4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC subclone 11細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞、P388D1細(xì)胞
HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞
T/G HA VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞
P 3 HR 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-31細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞
P 3 HR 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-31細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞
Ca761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2170細(xì)胞、ST細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞
H-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102PT細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞
HN13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBEo細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞、R 1610細(xì)胞
PK136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞
H2052_MM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-368細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞
CAL 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK2細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞
PT-K75細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM5細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞
HS0578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cells (TK-)細(xì)胞、TK 10細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞
hUC-MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞
HFF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞、P3.653細(xì)胞
CTX TNA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細(xì)胞、USMC細(xì)胞、C-32細(xì)胞
Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞、32D.3細(xì)胞
Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞、32D.3細(xì)胞
BCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、High-5細(xì)胞、H-810細(xì)胞
OCI-LY-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-251細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞
MFE296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL1細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞、HBL1細(xì)胞
K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞
L363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1-6細(xì)胞、H1568細(xì)胞、S180細(xì)胞
T HEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E-115細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞
H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES-1細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
ACC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞、OC-316細(xì)胞
LMTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞、MOLM-13細(xì)胞
SKLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、H2085細(xì)胞、CNE2細(xì)胞
Namalva細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞
TCMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT.64細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞、H-23細(xì)胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞
675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-428細(xì)胞、VM-CUB-I細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞
CAL120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR90細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞、RK-13細(xì)胞
ST2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R D細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞、Hs675細(xì)胞
M-1 myeloid leukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細(xì)胞、H69/P細(xì)胞、RAT2細(xì)胞
VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、EST81細(xì)胞
HEK 293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞
Hs-281-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW01細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞
NCI-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 212細(xì)胞、SUD4細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞
SUM159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS153細(xì)胞、KMH2細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞
MAVER-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-193細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞
MCF-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞、EB-2細(xì)胞
COLO-320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-812細(xì)胞、G-401細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞
U373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細(xì)胞、C127細(xì)胞、CHP126細(xì)胞
H-2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL-2細(xì)胞、Y-79細(xì)胞、RN-c細(xì)胞
HFL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-SB細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞、H196細(xì)胞
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
HCGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H-1細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞
HuP-T3 epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系
CAL-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞
NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS180細(xì)胞、RC-2細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞
COLO824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87MG細(xì)胞、BT 549細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞
MBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-16細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞
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