"NCI-H2029 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! RGC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞 M-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW626細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞 Hela-Ap-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 NCI-H2029 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細(xì)胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來自一個受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動各不相同。 細(xì)胞傳代方法:1:3-1:5傳代; Sp2/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1623細(xì)胞、LS180細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞 COLO 320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197.T細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞 CHP-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT 3細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞 P30/0HK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC3細(xì)胞、H2107細(xì)胞、293 Ad5細(xì)胞 SN12-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞、108CC15細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NCI-H2029 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞 NRK-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞、PC9細(xì)胞 8305C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN28細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞 hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞 RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞 CCD 1112SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-432細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞、H-1650細(xì)胞 NCI-H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞 NCIH2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-148細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞 MOLP8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341MD細(xì)胞、LX-2細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞 MFM-223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU-1細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞 NCI-H2029 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 MDA-MB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-795細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞 NS653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1869細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞 UWB1.289+BRCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 1細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞、SUM149細(xì)胞 NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞 MV-4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-3細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞 H-2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-99A細(xì)胞、WiDr細(xì)胞、WM115F細(xì)胞 H-2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-99A細(xì)胞、WiDr細(xì)胞、WM115F細(xì)胞 RKN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu177細(xì)胞、OE33細(xì)胞、ECV304細(xì)胞 Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206F細(xì)胞、NB.4細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞 PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1694細(xì)胞、hEEC細(xì)胞、HCT116細(xì)胞 M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞 AR4IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞 M059K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMCG1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞、M07e細(xì)胞 SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞 Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞 Hs852T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA871細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞 WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞 NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞 Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞 FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細(xì)胞、SW1088細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞 H-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞 T-98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320DM細(xì)胞、TC7細(xì)胞、MV-522細(xì)胞 D283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu99A細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞 JeKo-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM2細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞、H1734細(xì)胞 373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624 MEL細(xì)胞、ARPE19細(xì)胞、HMEL細(xì)胞 RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞 MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞 Mono Mac6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:138 MG細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞 C3H10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1573細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞 AC29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1-B細(xì)胞、H8細(xì)胞、GM3190細(xì)胞 COLO206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6-M1細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞 SHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細(xì)胞、H-2087細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞 H865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293FT細(xì)胞、B16F0細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞 H-2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/28細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞 HECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 19Lu細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞 UMNSAH/DF#1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149細(xì)胞、HELF細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞 C3H10T1/2 clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-1細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞 RH-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR-20細(xì)胞、SK-N-BE2C細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞 HMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H226細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞、H4細(xì)胞 Keio University-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞 HLEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca8113細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、DHL5細(xì)胞 H-1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞 HPAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞 H-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHRF細(xì)胞、SNU368細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞 H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞 HO-8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞 BC3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:769P細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞、GEO細(xì)胞 H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞 NCI-Hut 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1800[RA]細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞、Strain V細(xì)胞 OsACL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、LU65細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞 NCI-H2029 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 ZR75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1522細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞 SK MES 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.3細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、HHUA細(xì)胞 BCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞 8305C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN28細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞、C12細(xì)胞 "
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