"CL1-5 epithelioid cells人肺腺癌細胞系
細胞背景資料:肺腺癌;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
WEHI 164 TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞
DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
SKLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
細胞生長:貼壁
CL1-5 epithelioid cells人肺腺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
32Dc3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M(TK-)細胞、BMSCs(mBMSCs)細胞、BE(2)M-17細胞
HT 1376.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞
3T3F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞
HuCCT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98細胞、AR-42J細胞、RPMI1788細胞
BHK 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CL1-5 epithelioid cells人肺腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
TI-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞
SW-579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞
7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞
MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
HEp-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞
NL20SV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞
HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
SCL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞
CL1-5 epithelioid cells人肺腺癌細胞系
130T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞
Mv1Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞
H4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
SVEC 4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞
SNU638細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞
SNU638細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞
NCI-H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞
MDA-MB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞
SW 1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞
H.Ep.-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞
Huh 7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa2細胞、Lewis Lung Cancer細胞、SUM 190細胞
Hs706T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR786細胞、JC細胞、Panc02細胞
T_T_細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞
mousepodocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HH [Human lymphoma]細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MCA-38細胞
A673細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN1細胞、SHI-1細胞、UCW 100細胞
OE21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞
Colon26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABE8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞
LIPF155C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
LIPF155C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
SHSY-5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞
T.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU5細胞、H1838細胞、KNS81細胞
H-2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
M109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞
HL60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
UCD-MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞
H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞
HCC0095細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
P36細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
NT2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞
Hs 604.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞
CCD 841 CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞
OUMS-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
NCI-H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞
NCCIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-929細胞、Ca Ski細胞、NPC-TW01細胞
MARC 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL2細胞、CP70細胞、T-T細胞
L6565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞
H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
WM2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細胞、P3J HR1-K細胞、KYSE 50細胞
CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
MEL-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞
Hs 888.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞
LM-TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
NCI-H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞
EA. hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190PT細胞、THLE-2細胞、AU 565細胞
CAL-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
HCO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞
CL1-5 epithelioid cells人肺腺癌細胞系
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
TEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.CL2細胞、NIH-3T3細胞、LP-1細胞
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、SU-DHL-4細胞
TI-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2.1-7細胞、C17.2細胞、OACP4C細胞
"