"MT-4 Cell:人急性淋巴母細胞白血病細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞
H1666_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
PG-LH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSMC細胞、T/GHA-VSMC細胞、CAL 78細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MT-4 Cell:人急性淋巴母細胞白血病細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BIC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
A9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1688細胞、H-1573細胞、A-10細胞
SCC 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞
ABC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞
WM266mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞
細胞生長特性:懸浮生長
MT-4 Cell:人急性淋巴母細胞白血病細胞系
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣;圓形
2PK-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞
LuCL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD 18細胞、BC-025細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞
CHOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞
RMS1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞
Kato-III細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
PG-LH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSMC細胞、T/GHA-VSMC細胞、CAL 78細胞
293T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞
MT-4 Cell:人急性淋巴母細胞白血病細胞系
SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA436細胞、U-138MG細胞、U373-MG細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
VMRC-LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞
RM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
Hs839T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG ATCC細胞、PANC0203細胞、SK-Hep1細胞
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
C6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1975細胞、GNM細胞、MUTZ-3細胞
Mino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞
Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞
Vero細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞
H-2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞
MDCK Type II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞
SNU368細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC366細胞、CG4細胞、COLO-680N細胞
YH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL-20細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、NCIH596細胞
HIT clone T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞
L363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞
SW 954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞
AR4-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞
FRO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441-4細胞、hUC-MSC細胞、H716細胞
MHCC97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
H-1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
ChaGo-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞
CNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
GM-637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞
MDA-MB-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞
EFM19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞
DMS53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca-Ski細胞、L428細胞、H1836細胞
HL-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
UT-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞
NCI-H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
MBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
Caco-2BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞
HCC-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
C518細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx-5細胞、SV40 MES 13細胞、HLE-SRA-01/04細胞
BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞
WEHI3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞
QGY-7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞
MT-4 Cell:人急性淋巴母細胞白血病細胞系
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
HOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98 G細胞、HSC-2細胞、SW962細胞
SW1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞
Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞
NCIH187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞
L 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
LICR-HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞
SKHEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
CEM T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL5細胞、AAV293細胞、Mevo細胞
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