"Raji Cell:人Burkitt’s淋巴瘤細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:Raji細胞由PulvertaftRJV于1963年從一位11歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt淋巴瘤中分離建立的,是個人類造血系統(tǒng)的連續(xù)傳代細胞,為B細胞起源。該細胞中含有EBV,需要在二級生物安全柜中操作;可作轉(zhuǎn)染宿主。
22Rv-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
Human Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
H-810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Raji Cell:人Burkitt’s淋巴瘤細胞系
細胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況你自己把握)。這是第四步。其實還可以有第五步,對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低,保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了,如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:維持細胞濃度在4×105/ml-3×106/ml;根據(jù)細胞濃度每2-3天補液1次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCT FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
U-118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH82細胞、NTHY-ORI3.1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞
M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
細胞生長特性:懸浮生長
Raji Cell:人Burkitt’s淋巴瘤細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣
293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1Ag 4.1細胞、H-2066細胞、LADMAC細胞
PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞
Hs 888.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
H-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞
FHC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞
KU-812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
Raji Cell:人Burkitt’s淋巴瘤細胞系
RPMI 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞
MN 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞
GM3570細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞
DI-TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
P3/NSI/1-AG4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞
OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞
HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞
BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞
OVCAR433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
OVCAR433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
SK-RC-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LoMeT-ccRcc細胞、U87細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞
IM95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
MKN-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞
CL 1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
SKLMS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC-21H細胞、PLA 802細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞
HT 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
BT325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY細胞、J82細胞、HuH7細胞
MCF-7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞
A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞
BV-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞
JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞
PK (15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
SW 982細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
ACT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2-Ad細胞、SW1990細胞、H1688細胞
CHO Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/BBe細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、A375S2細胞
MASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
Anip[973]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
TGBC11TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
BE2-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞
293AD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AHH-1細胞、GC-1spg細胞、UCLA-SO-14細胞
HCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞
COLO 357細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞
FD-LSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞
NHRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞
AZ-521細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADISON LUNG TA-109細胞、MOLT.4細胞、T98-G細胞
Raji Cell:人Burkitt’s淋巴瘤細胞系
Pa017C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞
SW948細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
RBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
NBL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT-K75細胞、GM-637細胞、WI 38細胞
UT7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞
NS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB 106細胞、MLOY4細胞、KYSE-140細胞
OSKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
OACP4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
A-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB468細胞、HCC1937細胞、P30-OHK細胞
HeLa-S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、SK-ES-1細胞、RPMI 2650細胞
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