"NCI-H2023 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞 HeLa-S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、P3-X63-Ag8細胞、SW 579細胞 HL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H2023 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:每周換液2次 SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞 SP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞 STTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞 HEK-AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞 KMS11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NCI-H2023 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 HMEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞 CCRF/CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞 SW-1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞 H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mia PACA 2細胞、MM134細胞、H660細胞 L 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞 CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞 NCI-H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-T4細胞、MCA205細胞、BT 20細胞 LAN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞 H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞 Mouse Forestomach Carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 205細胞、GM00346B細胞、Capan-1細胞 NCI-H2023 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 UO.31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞 Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞 THEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞 NBL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞 CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞 SN12PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞 SN12PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞 KY-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B78細胞、H1688細胞、COV362細胞 U87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-19細胞、EFM-192C細胞、BHK 21細胞 H-1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞 HBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 832(C).T細胞、SW1222細胞、CWR22R細胞 MCF-7/AdrR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞 Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞 RFL 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞 Centre Antoine Lacassagne-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 134VI細胞、HOS細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞 H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mia PACA 2細胞、MM134細胞、H660細胞 SCI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞 2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞 Ra #1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞 Hs-274-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞 GL-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞 JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞 T-ALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞 HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞 RPMI no. 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞 PC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞 Human ErythroLeukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞 LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞 SW-48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞 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01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞 HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞 P3/X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97細胞、MOVAS細胞、HCC-366細胞 Panc2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2-C8細胞、U266BL細胞、C 6細胞 Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞 NCI-H2023 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 SUM-190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-F1細胞、Calu-1細胞、CWR22-R1細胞 HNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm5F細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、NS-1-Ag4-1細胞 CAMA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-7702細胞、Hs 695.T細胞、RKO-AS45-1細胞 SW-1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMO-1細胞、OCI-Ly 8細胞、SK.MEL.5細胞 "
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