"HCC1419 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來(lái)復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn),不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō),人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。 HLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-T6細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞 HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞 NCI-H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS2B細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 HCC1419 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 16HBEo-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH3255細(xì)胞、MH7A細(xì)胞、aNK細(xì)胞 SDBMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hSCC-25細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞、VMM39細(xì)胞 NCL-H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM13細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞 NCI-H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 684細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞 hTERT-RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs821T細(xì)胞、STTG1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 HCC1419 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過(guò)20%,因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足,過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 MDA-MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞 C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-024細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞 WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞、L cell細(xì)胞 CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞 VERO76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3CA細(xì)胞、SCC090細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞 Det 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Loucy細(xì)胞、G402細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞 P3-X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 32細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞 H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H522細(xì)胞、MEF (CF-1)細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞 HKC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-982細(xì)胞、PL9細(xì)胞、BL1339細(xì)胞 CEM-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 468細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞 HCC1419 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 HS-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞 U031細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL299細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞 T 84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞、BCP1細(xì)胞 NCI-SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞、COR L279細(xì)胞 LIPF178C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞 NE1-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU668細(xì)胞、H-1105細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞 NE1-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU668細(xì)胞、H-1105細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞 143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM2細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞 F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO 175.T細(xì)胞、H23細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞 OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞 CAKI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞 Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-869細(xì)胞、SK-Col-1細(xì)胞、D341細(xì)胞 KYSE410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞、WPE-int細(xì)胞 MDA.MB.435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell with DC Morphology細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞 MKN45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-671細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞 MA104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS-76細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞、HSC1細(xì)胞 SW 480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c 3T3細(xì)胞、CAL120細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞 COLO357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H810細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞 QBC-939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC13細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞 ZR-75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1/original細(xì)胞、SiHa細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞 CWR22-R1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞 KG-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HVSMC細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞、QG-56細(xì)胞 PC.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NM-C細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞 MDA-MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞 G-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118MG細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞 HBE 135-E6/E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL-124細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞、HPMC細(xì)胞 J 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK-13細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、REC細(xì)胞 Eca 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910/PM細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、SNU869細(xì)胞 Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞 BrCL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM2-4175細(xì)胞、HM06.A1細(xì)胞、EOL1細(xì)胞 TPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-4細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞 H4IIEC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞 MIN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC090細(xì)胞、DCS細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞 Hs 683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RDES細(xì)胞、Hs606細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞 Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞 COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞 Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-5細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞、CHG5細(xì)胞 NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞 H-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102PT細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞 PTK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2052細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞、MuM-2B細(xì)胞 MAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2B細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞 NCIH23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD-3細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞 33604細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-18細(xì)胞、H-711細(xì)胞、U118細(xì)胞 OCI/AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDST8細(xì)胞、293FT細(xì)胞、He La細(xì)胞 AM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞 NCIH208細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6565細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、M-G63細(xì)胞 253JB-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV2008細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞 KNS81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-J2細(xì)胞、LS-513細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞 CCD1112Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1RGB細(xì)胞、BL6細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞 AZ521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6 Swiss Albino細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞 Panc 4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3細(xì)胞、RTE細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞 HCC1419 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 Ramos.G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞、HUC細(xì)胞 D10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞 OS-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC2細(xì)胞、C4-2細(xì)胞、HS-68細(xì)胞 WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、H-2195細(xì)胞 "
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