"HCC1143 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很?chē)?yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! SuDHL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.Bst細(xì)胞、LS-411細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞 MCF7-CTRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP-1細(xì)胞、RS411細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞 CESS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-19細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞、CaSki細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 HCC1143 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來(lái)自胎兒傳代50次后衰老死亡,來(lái)自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來(lái)自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來(lái)自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無(wú)定論,出現(xiàn)過(guò)好幾種理論與假說(shuō),其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說(shuō)”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正?,F(xiàn)象,常見(jiàn)的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱(chēng)為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱(chēng)為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無(wú)用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過(guò)程,無(wú)論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來(lái)說(shuō),都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過(guò)量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2—1:4傳代,每周換液2—3次 H-548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL-5細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞、HR8348細(xì)胞 MC57細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19-RIKEN細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、NPA細(xì)胞 Earle's L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGECs細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞、JHH7細(xì)胞 SW-1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK4細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞、U14細(xì)胞 293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-16細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞、H1693細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 HCC1143 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞 Melan-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC15細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞 QGY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1112sk細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞 COV362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-1細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞 KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPa2細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞 NCI-H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJCRH30細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞、H2170細(xì)胞 U251n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-9細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞、H-1672細(xì)胞 Hs-940細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞、751-NA-15細(xì)胞 HK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 10細(xì)胞、2E8細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞 KMS18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20-Y細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞 HCC1143 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 CHL-IU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812-F細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞、QGY-7703細(xì)胞 HRMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-90細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞 GA-10 (Clone 4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM細(xì)胞、CEM細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞 L540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx5細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞 UCLA RO-81-A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞 Hs_578t細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZC-1細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞 Hs_578t細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZC-1細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞 TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞 MARC 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL2細(xì)胞、CP70細(xì)胞、T-T細(xì)胞 A-253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI2650細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞、SW756細(xì)胞 KASUMI6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1435細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞、RMG1細(xì)胞 HT 1197.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBSMC細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞 KYSE450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM 6細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞、KMBC細(xì)胞 P388.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKHEP1細(xì)胞、BT 549細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞 NCIH1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 480細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞 Caco2-BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞 CAMA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞、WERI細(xì)胞 P3X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞 OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞 NCI H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-747細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞 SV-HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD-293細(xì)胞、231-luc細(xì)胞、NCM356細(xì)胞 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