"HCC1428 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞 OUMS-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞 NCI-H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞 細胞生長:貼壁 HCC1428 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:4-1:8傳代;每周換液2-3次。 Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞 HIT clone T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞 BALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞 SK BR 03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HCC1428 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長,偶爾上皮細胞液泡的形成 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! PL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞 Hs 729.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞 MIA Paca2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-28細胞、rRTEC細胞、BL2141細胞 L02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1651細胞、NCI-H1435細胞、B958細胞 P3X63 Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞 Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞 COLO824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87MG細胞、G422細胞、H146細胞 BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞 OE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞 BA/F3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞 HCC1428 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 COLO 320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞 C57 Mouse Tumor 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3細胞、MDAPCa2b細胞、RT-4細胞 HCC827細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞 OS-732細胞系相關(guān)產(chǎn)品:6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞 Tca-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞 HeLa/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞 HeLa/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞 HEK293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞 AE 1201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞 Hut292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞 VMRC-LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞 SK-MEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV173細胞、ACC-M細胞、MDA-436細胞 JROECL 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞 COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞 HCC-2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞 AC16 [Human hybrid]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞 SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞 H-187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞 H-378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞 EnCa1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2-WT細胞、CHL-11細胞、NCI-H2023細胞 293/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞 DR2R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞 BDCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML2細胞、Plaepi 34細胞、SUIT-2細胞 UT7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞 OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞 Colo-678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞 GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞 Be Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB330細胞、LNCaP C4-2B細胞、IMR-32細胞 U-2 OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞 WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞 THLE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞 TE671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-Mel細胞、SK.MEL.28細胞、Y3.AG.1.2.3細胞 GM16136細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞 QGY-7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞 MDA-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞 SUM-149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞 HepG2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞 HEY A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞 SkChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞 VCaP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞 NCI-H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞 PANC 1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞 OP9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞 RIN-m 14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1783細胞、SHG44細胞、SupB15W細胞 MDCKII-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞 HSC(Human Schwann)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞 LUDLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞 Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞 Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞 HANK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞 HANK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞 HCC1428 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 CMT167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞 H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639 V細胞、NCIH187細胞、BCPAP細胞 HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細胞、LICR-LON-HN6細胞、HKF細胞 MIA Paca2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-28細胞、K-562細胞、BT.549細胞 "
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