"Daoy epithelioid cells人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
TOV-21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞
X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
NCIH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞
細胞生長：貼壁
Daoy epithelioid cells人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞傳代方法：１：４-１：６傳代；每周換液２-３次。
KCL22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞
Mia PACA 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118細胞、Ramos 1細胞、GM06141B細胞
SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
QBI-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Daoy epithelioid cells人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：多邊形
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
SUM-159細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞
HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
HHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞
SuDHL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞
HTori-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
GM00637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞
MT-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞
Hep 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞
A-375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞
Daoy epithelioid cells人腦髓母細胞瘤細胞系
SNK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
HB611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB（HCF）細胞
HT(H9)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞
NK92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
SK-ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
Hi-five細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞
ECC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞
LAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
Hs 819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞
CHO-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞
BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞
BNL-HCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
MA104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS-76細胞、MOLM16細胞、HSC1細胞
Tb 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
AR41P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞
SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
HPDE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
SK-Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞
GM17219細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞
NCIH1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞
RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
Kasumi-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞
CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞
OVCA 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞
Y3-Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞
B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI6666細胞、SW-1783細胞、ASH3細胞
NCIH841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
TPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞
SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞
PGLH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
CG4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞
OC316細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞
EFM192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞
HL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞
SUIT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞
UM-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
CCF-STTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞
SJ-RH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
DSL6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞
HCC0038細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG細胞、Hs688(A)T細胞、J-774細胞
Mv.1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
Nb 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞
NALM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA)細胞、IPEC-J2細胞、CTV1細胞
BrCL18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞
Daoy epithelioid cells人腦髓母細胞瘤細胞系
JTC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞
MCF-12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、TOV112D細胞
CA-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T15細胞、JB 6細胞、SK HEP 01細胞
HHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322細胞、MCF10A細胞、B16F1細胞
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