"RD-ES epithelioid cells尤因氏肉瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 TE354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S.B.細(xì)胞、HCC44細(xì)胞、RS1細(xì)胞 AU 565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det 562細(xì)胞、OCM1細(xì)胞、WC00097細(xì)胞 My-La 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266 AR1細(xì)胞、H345細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 RD-ES epithelioid cells尤因氏肉瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沈淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號(hào)的血清。 細(xì)胞傳代方法:1:8傳代:每周換液2-3次 UO31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL-2細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞 RT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRFCEM細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞 Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KATO III細(xì)胞 CEM T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL5細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 RD-ES epithelioid cells尤因氏肉瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁和懸浮混合 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞 MADB106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEG3細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞 P3X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3570細(xì)胞、L6565細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞 CL-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA134細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞 OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞 H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M21細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞、HGE細(xì)胞 JB6 [Mouse]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞、ST-2細(xì)胞 MDA-PCa-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2110細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞、MLMEC細(xì)胞 EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞 L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細(xì)胞、A375mel細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞 RD-ES epithelioid cells尤因氏肉瘤細(xì)胞系 CSQT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞、BT-474細(xì)胞 COLO-684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 273細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞、Hs852細(xì)胞 A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞 IMR 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RenCa細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞、H1048細(xì)胞 SW1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69細(xì)胞、SF539細(xì)胞、TE1細(xì)胞 MDA-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞 MDA-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞 MDAMB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH647細(xì)胞、PTK1細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞 MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞 GM00637I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH292細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞 E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞 SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞 SUDHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞 H-2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116/L細(xì)胞、LoVo細(xì)胞、H1563細(xì)胞 Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞 HNE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04678細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞、LM-TK-細(xì)胞 UM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞 MDA-MB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞、CTX TNA2細(xì)胞 Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞 MDA-MB-435-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225-K6細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞 ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞 Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O-Ag14細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞 KMM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12F細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞 TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞 OCIAML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF1細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞 OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞 H-1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCO細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞、MCFs細(xì)胞 COLO 201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞 Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞、RCC4細(xì)胞 RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細(xì)胞、H-2195細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞 TCam 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-HSR細(xì)胞、OCI-Ly 7細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞 H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-3細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞 SU86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2D1細(xì)胞、BIC細(xì)胞、H-1435細(xì)胞 9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZYM-DIEC02細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、HCC1008細(xì)胞 GM01232E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞 Hs695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞 TSCCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1-289細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞 H283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 Bl細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞 SK-MEL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY-1細(xì)胞、GM07404D細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞 PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞 Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2330細(xì)胞、H-661細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞 SK-RC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-15細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞 BE2-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO680N細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、SW1222細(xì)胞 RenCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、MT-2細(xì)胞 RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞 University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2132細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞 SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCe-8693細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞 L5178YR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞 H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞 RL-952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16細(xì)胞、BEND細(xì)胞、TE3A細(xì)胞 RD-ES epithelioid cells尤因氏肉瘤細(xì)胞系 L 428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU475細(xì)胞、HCC-1833細(xì)胞、QGP1細(xì)胞 PL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM細(xì)胞、J82COT細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞 SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞 P3X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3570細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、BSC1細(xì)胞 "
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