"COS-1 epithelioid cellsSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系 細胞背景資料:該細胞源自CV-1細胞株,經(jīng)轉(zhuǎn)染編碼野生型T抗原、起始點缺陷突變的SV40得到;細胞中整合有SV40基因組完整早期區(qū)段的單個拷貝。該細胞表達T抗原,適用于需要SV40T抗原表達的載體的轉(zhuǎn)染;保留SV40溶細胞性生長的特性;支持40℃時溫度敏感性A209病毒的復制;支持早期區(qū)段缺失的SV40純體的復制。因含有SV40的DNA序列,該細胞需要在2級生物安全柜中操作。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項:1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。2.進入凈化室前先關閉紫外燈,打開超凈臺風機,等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風機的超凈臺,應使瓶口斜置,應盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復工作臺面。 NCI-H1404細胞系相關產(chǎn)品:THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞 Eca 109細胞系相關產(chǎn)品:HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞 UACC 812細胞系相關產(chǎn)品:RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞 細胞生長:貼壁 COS-1 epithelioid cellsSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:2傳代 NCIH1355細胞系相關產(chǎn)品:HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞 ST-2細胞系相關產(chǎn)品:SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞 Tb1Lu細胞系相關產(chǎn)品:J-774細胞、SUM-52細胞、BE(2)C細胞 Hs 737.T細胞系相關產(chǎn)品:293 F細胞、BT細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞 H-1838細胞系相關產(chǎn)品:SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 COS-1 epithelioid cellsSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣 如何進行細胞復蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調(diào)整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】1)從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。 L1210細胞系相關產(chǎn)品:HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞 P3J HR1-K細胞系相關產(chǎn)品:A-101D細胞、HCC1008細胞、NCIH1563細胞 FDC-P1細胞系相關產(chǎn)品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞 Rainbow Trout Embryo細胞系相關產(chǎn)品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞 HS 445T細胞系相關產(chǎn)品:MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞 TPC-1細胞系相關產(chǎn)品:OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞 PAI細胞系相關產(chǎn)品:UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞 K562細胞系相關產(chǎn)品:SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞 C33細胞系相關產(chǎn)品:2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞 Hs 888Lu細胞系相關產(chǎn)品:Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞 COS-1 epithelioid cellsSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系 PC615.3細胞系相關產(chǎn)品:HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞 CA-46細胞系相關產(chǎn)品:B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞 B16/F1細胞系相關產(chǎn)品:H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞 AM-38細胞系相關產(chǎn)品:NRK52E細胞、EBNA-293細胞、HN-6細胞 Pro-5WgaRI3C細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞 Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞系相關產(chǎn)品:Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞 Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞系相關產(chǎn)品:Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞 SU-DHL-16細胞系相關產(chǎn)品:RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞 RPMI8226細胞系相關產(chǎn)品:TERT-RPE1細胞、PLA801-95C細胞、LIPF178C細胞 BAEC細胞系相關產(chǎn)品:C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞 H2347細胞系相關產(chǎn)品:ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞 SKO3細胞系相關產(chǎn)品:143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞 SKN-AS細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1238細胞、Glioma-261細胞、Earle's L cells細胞 TE353.SK細胞系相關產(chǎn)品:Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞 HS940細胞系相關產(chǎn)品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞 Eca109細胞系相關產(chǎn)品:H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞 293T細胞系相關產(chǎn)品:CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞 Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關產(chǎn)品:H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞 NCIH1694細胞系相關產(chǎn)品:GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞 NTC200細胞系相關產(chǎn)品:SUPB15細胞、SK-ES細胞、P815細胞 NCIH510細胞系相關產(chǎn)品:N-9細胞、HCT GEO細胞、SNU-886細胞 RPMI-8226細胞系相關產(chǎn)品:Human Epithelioma-2細胞、CCRF-CEM細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞 M21細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞 W256細胞系相關產(chǎn)品:HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞 A2780/Taxol細胞系相關產(chǎn)品:RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞 T-ALL1細胞系相關產(chǎn)品:RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞 EB-3細胞系相關產(chǎn)品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞 OVCAR3細胞系相關產(chǎn)品:BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞 OCI Ly1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞 P3-X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:IMR 32細胞、SMMC 7721細胞、HCC-15細胞 A-498細胞系相關產(chǎn)品:Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞 HLE B-3細胞系相關產(chǎn)品:M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Ly1細胞、CZ-1細胞 Caki-1細胞系相關產(chǎn)品:NPA-87細胞、NCIH929細胞、GM-3573細胞 NCI-H1672細胞系相關產(chǎn)品:BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞 HGC-27細胞系相關產(chǎn)品:FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞 HLF-a細胞系相關產(chǎn)品:TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞 578T細胞系相關產(chǎn)品:ME1細胞、MES 23.5細胞、HT 29細胞 He-La細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞 HCT FET細胞系相關產(chǎn)品:NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞 SK MEL-28細胞系相關產(chǎn)品:Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞 OCI Ly10細胞系相關產(chǎn)品:SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞 PL45細胞系相關產(chǎn)品:4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞 Mono Mac 1細胞系相關產(chǎn)品:BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞 HR8348細胞系相關產(chǎn)品:DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞 Human Embryo Kidney-2細胞系相關產(chǎn)品:U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞 TE-10細胞系相關產(chǎn)品:NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞 NCIH1092細胞系相關產(chǎn)品:RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞 BI-Mel細胞系相關產(chǎn)品:KHYG-1細胞、SkChA1細胞、SW.620細胞 FHCRC-11細胞系相關產(chǎn)品:Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞 HBdSMC細胞系相關產(chǎn)品:SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞 MV522細胞系相關產(chǎn)品:PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞 COS-1 epithelioid cellsSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系 NCM-460細胞系相關產(chǎn)品:H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞 JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關產(chǎn)品:JB6 Cl 30細胞、HSC-1細胞、OK細胞 HCV 29細胞系相關產(chǎn)品:Ly19細胞、HCC0070細胞、TE7細胞 FDC-P1細胞系相關產(chǎn)品:CMT-93細胞、NCI-H740細胞、KM-H2細胞 "
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