"FaDu epithelioid cells人咽鱗癌細胞系 細胞背景資料:1968年從一位印度下咽骨腫瘤患者的鉆孔活組織切片中建立了FaDu細胞株。在建立的細胞株中發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)中含有成束的細絲,并且細胞分界上的橋粒特別突出。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 TE5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞 L-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞 P36細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞 細胞生長:貼壁 FaDu epithelioid cells人咽鱗癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 TE-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞 ME-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL-6細胞、B16 F1細胞、SJ-Rh 30細胞 KPL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1417細胞、SW626細胞、BMDC細胞 SKNBE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞 Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 FaDu epithelioid cells人咽鱗癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 SU-DHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞 Hs.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞 P3X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞 TMD-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-FT細胞、SKNBE-2細胞、CEM-0細胞 3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞 KYSE270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞 MOLM13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞 SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞 Wien133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞 D 407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞 FaDu epithelioid cells人咽鱗癌細胞系 HEK AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞 M3 Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞 MHCC97L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞 NBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞 B16BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞 SCLC-21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞 GS9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細胞、RAMOS2G64C10細胞、RGE細胞 BNL 1MEA.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞 WC00097細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0202細胞、MFE-296細胞、SEM細胞 MDAMB330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞 P3 NS1 Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞 3T3 L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞 DH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞 QGP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞 HIT T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞 MN-9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞 SKCO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞 P388.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKHEP1細胞、BT 549細胞、U-87MG ATCC細胞 HEEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞 COV504細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞 Ca Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞 NCI-SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞 HSC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞 VM Cub 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞 SNU407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞 JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞 HEK-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6.4C10細胞、OCI-Ly19細胞、NPA'87細胞 F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞 P3-X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞 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HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞 UWB1.289+BRCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 1細胞、MDA-MB-435細胞、SUM149細胞 3T3L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞 KPL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞 DSL-6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-420細胞、MDA175細胞、A427細胞 FaDu epithelioid cells人咽鱗癌細胞系 Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞 L(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57G細胞、H-1694細胞、COLO678細胞 SUM-190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-F1細胞、MT-2細胞、H-2291細胞 P3X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細胞、NCIH128細胞、H-1915細胞 "
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