"AD-293 epithelioid cells人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAI細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞
801-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC1細(xì)胞、Panc02細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞
NPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細(xì)胞、JB-6細(xì)胞、GM16136細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
AD-293 epithelioid cells人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀枞^濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
DHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1793細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞
C41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞
H-1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 863.T細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞、H-1238細(xì)胞
MCA-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN 1細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞
MAntle cell VERona-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL88細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞、Tu686細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
AD-293 epithelioid cells人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
OVCAR10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 937細(xì)胞、LS-180細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞
LPC-H12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 42細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2106細(xì)胞、130 T細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞
NCI-H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML 12細(xì)胞、MC38細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞
IMR-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1細(xì)胞、WILL2細(xì)胞、MIN6細(xì)胞
6-10B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA-1細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞
SW 1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239A細(xì)胞、PF382細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞
OCI-Ly07細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-175細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞、U118MG細(xì)胞
NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-600-T細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、293 H細(xì)胞
AD-293 epithelioid cells人胚腎細(xì)胞系
TE671/RD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB-F344細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞、SNU739細(xì)胞
ChaGo K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH1細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞
Panc 4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3細(xì)胞、RTE細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
SGC-996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細(xì)胞、HCET細(xì)胞、LAN1細(xì)胞
Hs888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 829細(xì)胞、Y79細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞
Hs888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 829細(xì)胞、Y79細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞
HepG2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、JKT1細(xì)胞
Colo741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞、TE671細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
CCRFCEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM-1S細(xì)胞、SR786細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞
SW-48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 16細(xì)胞、H-2030細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞
OCI-Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 49F細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞
LA-N-6(OAN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel RM細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞
GAK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-364細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞
OV2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4/1細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞
RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS-1細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞
L-428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞
PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-2細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞
NCM356細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK II細(xì)胞、REC1細(xì)胞、AK細(xì)胞
Panc_05_04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT1細(xì)胞、H2172細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞
C2BBe1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3-M細(xì)胞、GT39細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞
REC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-7細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞
Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞
P-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF/CD18細(xì)胞、184A1細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
Hi-five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh-74細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞
PLC/PRF/5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.G6.C10細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞
Scott and White No. 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H735細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞
KMBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-28細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞
Colon-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM/0細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞
COLO 679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAOV4細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞、NCIH2066細(xì)胞
D-283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞
Hk-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細(xì)胞、BT20細(xì)胞、PC-10細(xì)胞
CCD-19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh74細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、H358細(xì)胞
A-875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-433細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞
H-1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI.8226細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞
SU8686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL3A細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞
CACO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG231細(xì)胞、HFB細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞
H-1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、293A細(xì)胞
Y3-Ag1,2,3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞
P31FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-16細(xì)胞、ME1細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞
NSC-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMK細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞
WERI-Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDLM-2細(xì)胞、RT112細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞
Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞
LS180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW982細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞
C3H10T1/2 clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-1細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞
Eca-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL1細(xì)胞、F-36P細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞
UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞
AD-293 epithelioid cells人胚腎細(xì)胞系
NK62a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-1063細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞
HRIF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1細(xì)胞、SUM149細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞
NCIH2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH-2細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、SNU387細(xì)胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2106細(xì)胞、MGECs細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞
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