"HTR-8 epithelioid cells人滋養(yǎng)細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 OCIAML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞 GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞 Hs 832(C).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞 細胞生長:貼壁 HTR-8 epithelioid cells人滋養(yǎng)細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2傳代 NCI-SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞 LAD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞 HSF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞 ATC241細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞 EBNA293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HTR-8 epithelioid cells人滋養(yǎng)細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞 HHFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞 SK-MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞 HOS (TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞 6-10B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞 SK-GT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞 H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞 H-2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞 OVCAR 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞 BSC-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞 HTR-8 epithelioid cells人滋養(yǎng)細胞系 J774A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞 VMCUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞 NCTC-3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞 293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1Ag 4.1細胞、H-2066細胞、LADMAC細胞 PF-382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞 FRTL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞 ECC 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞 NCIH1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞 HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞 Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞 B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞 HCT/Taxo1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞 NTera2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞 HS-766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞 DV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞 LK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞 MPP-89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno-293細胞、COLO 738細胞、IBRS2細胞 HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞 UCLA NPA871細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞 C518細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx-5細胞、SV40 MES 13細胞、HLE-SRA-01/04細胞 GLC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞 H-1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞 HuT 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞 HS-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞 MC3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞 UM-UC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞 MDCKII-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞 P30-OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞 OCI/AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞 H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞 C38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL1細胞、NCI-H441-4細胞、RBL 2H3細胞 OVCA432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞 L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞 HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞 H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞 PCI-4.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞 NCI-H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞 Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251_MG細胞、NHRF細胞、HT-3細胞 NHLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞 A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞 Detroit 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞 C8-D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞 SNU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞 EM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞 SW-780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞 HPMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞 ACC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞 SKBr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞 HEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞 Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞 HTR-8 epithelioid cells人滋養(yǎng)細胞系 NCIH1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375SM細胞、DMS53細胞、UMR 106細胞 KP-N-YN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-954細胞、GM15452細胞、Dx5細胞 SK-MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4細胞、NCI-H660細胞、Hs 281.T細胞 "
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