"PLA-802 epithelioid cells人惡性橫紋肌肉瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時,拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! NCI-SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-441細(xì)胞、MKN 28細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞 LPC-H12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 42細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞 SUM-149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMOS2G64C10細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 PLA-802 epithelioid cells人惡性橫紋肌肉瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 HSC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞、NSH細(xì)胞 SGC 7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2932細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞 UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞 PLB985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞 H-748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel624細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 PLA-802 epithelioid cells人惡性橫紋肌肉瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞 786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞 NCIH1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞 A-172MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEpiC細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞 HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-3_27細(xì)胞、KNS62細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞 Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞 H-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞 GC-1 spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H3255細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞 Natural Killer-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL15細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞、H-865細(xì)胞 H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞 PLA-802 epithelioid cells人惡性橫紋肌肉瘤細(xì)胞系 293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-16細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞、H1693細(xì)胞 Cor L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1573細(xì)胞、SW-900細(xì)胞、CV1細(xì)胞 MV(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC12(高分化)細(xì)胞、WISH細(xì)胞、451-LU細(xì)胞 MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞 H-1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2023細(xì)胞、MIN6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞 SW-1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N-1細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞 SW-1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N-1細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞 T84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2780細(xì)胞、KU 812細(xì)胞、GTL16細(xì)胞 SV-HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD-293細(xì)胞、231-luc細(xì)胞、NCM356細(xì)胞 HCC-1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2087細(xì)胞、ARH77細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞 KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞 L cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C38細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞 33604細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-18細(xì)胞、H-711細(xì)胞、U118細(xì)胞 HCC-1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256-TC細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞、MEF細(xì)胞 NCI-BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO31細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞 HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞 SCLC-21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA-1細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、231-luc細(xì)胞 LC-2/ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85 clone 5細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞、AG 9細(xì)胞 1E8-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞 SKOV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1703細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞、MC-26細(xì)胞 U373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞、H-1395細(xì)胞 H-1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2023細(xì)胞、MIN6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞 TC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMBC細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、A-72細(xì)胞 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Killer-92細(xì)胞 95-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 870 Emory University-4細(xì)胞、SHP77細(xì)胞、SCI1細(xì)胞 16HBE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-475細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞 JB-6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細(xì)胞、EC-109細(xì)胞、V79細(xì)胞 HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞 End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞 RMS13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115-mel細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞、SP2細(xì)胞 L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞 LLCMK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L615細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞 HFTF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞 SF 767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSUpr1細(xì)胞、ESC細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞 NCI-H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞 NS20-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞、FM-88細(xì)胞 OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞 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No. 2細(xì)胞 PLA-802 epithelioid cells人惡性橫紋肌肉瘤細(xì)胞系 PaTu 8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:22Rv1細(xì)胞、HK2細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞 ST2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R D細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞 KCL22S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞 NCIH1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ1細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、VMM39細(xì)胞 "
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