"THLE-3 epithelioid cells人肝永生化細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
TE32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
IOSE80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69C細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞、MGECs細(xì)胞
細(xì)胞生長:貼壁
THLE-3 epithelioid cells人肝永生化細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿
HT-29/CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:231-luc細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞、HL60細(xì)胞
SNU484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819T細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞
NCI-H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞
CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞
PF382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
THLE-3 epithelioid cells人肝永生化細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會(huì)對細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
Colon 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-31細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞、SkMel31細(xì)胞
HCA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI1細(xì)胞、H128細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞
CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞
OLN-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
PCI-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM-1細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞、HUT125細(xì)胞
HF-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞
H-1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD15細(xì)胞、H-2135細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞
HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞
KU-812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E304細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞
H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM0637細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞
THLE-3 epithelioid cells人肝永生化細(xì)胞系
V-79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY 1細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、A204細(xì)胞
COLO206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC7細(xì)胞、INS1細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞
HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞
624 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC1細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞
K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞
HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞
HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞
ST2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R D細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞、Hs675細(xì)胞
TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞
H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞
COLO-320-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞
293 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC5細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞、H-125細(xì)胞
ECC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、Z138細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞
Rat Fetal Lung-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 [Mouse]細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞
C166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞
T-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ML2細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞、BL-6細(xì)胞
OCI-LY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1Lu細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞
FOXNY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞
AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞
SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞
FLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs68細(xì)胞、PC10細(xì)胞、SNU484細(xì)胞
FHs74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRC-99細(xì)胞、Med 283細(xì)胞、LO2細(xì)胞
OKT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-638細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞
DV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca-109細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞
HMrSV5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL11細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞
VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、EST81細(xì)胞
SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞
HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞
HOC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞
Mevo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sci-1細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞
SW1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT325細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞
HL-60 clone15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLOY4細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞
SW579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human ErythroLeukemia細(xì)胞、HS766T細(xì)胞、Ej138細(xì)胞
BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞
NPA87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU 145細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞
MRC-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞、HO8910細(xì)胞
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞
Panc_05_04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT1細(xì)胞、H2172細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞
Eca109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H283細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、H1341細(xì)胞
HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FK81細(xì)胞、HuT78細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞
RBL.2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞、GM346細(xì)胞
OLN-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
hEEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa017C細(xì)胞、A-2780細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
MDA231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞
CCD-33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞
HCC1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA1800細(xì)胞、S-16細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞
A 72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞
HT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM35細(xì)胞、MIHA細(xì)胞、SNU1細(xì)胞
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞
THLE-3 epithelioid cells人肝永生化細(xì)胞系
Rat Skin 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M21細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞、CAL39細(xì)胞
SR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1788細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞
HCC-94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE D407細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞、H820細(xì)胞
CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞
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