"NCI-H441 epithelioid cells人肺腺癌細胞系
細胞背景資料:NCI-H441建系于1982年(A.F.Gazdar,etal.)。該細胞分離自一名肺腺癌患者的心包液。該細胞能在半固體瓊脂糖中形成克隆,并能表達肺泡表面活性蛋白A。該細胞在有血清培養(yǎng)基中倍增時間為58小時,在無血清培養(yǎng)基中倍增時間為99-138小時。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
NUGC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞
Anip973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
SKNBE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
細胞生長:貼壁
NCI-H441 epithelioid cells人肺腺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代
KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
TE 32.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 767細胞、WEHI-3B細胞、C1498細胞
UPCISCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞
ZR-75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-522細胞、G-Olig2細胞、DMS-114細胞
Panc02-H0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H441 epithelioid cells人肺腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
PC-3M 2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
RMa-bm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
TOV-112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞
KPL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1417細胞、SW626細胞、BMDC細胞
NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
Huh-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
NCI-H441 epithelioid cells人肺腺癌細胞系
Microbiological Associates-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞
4T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞
HIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞
NCI-H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞
GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞
D283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞
NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
LC-2-Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
Sp 2817細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞
RCSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.8細胞、H-2073細胞、LAN-5細胞
H-865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞
ATN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
BIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1563細胞、Adeno 293細胞、Panc-3_27細胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-69細胞、WI38細胞、H-292細胞
4T1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
OVCA-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
MHCC 97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞
SV40 MES 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞
Walker-Ca.256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu 177細胞、WSU-DLCL(2)細胞、KNS42細胞
HEC-1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞
CAMA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
HL-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
CoCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
SUM149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞
Hs888 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞
SK ES 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞
Hs 839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞
CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
NB9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM451細胞、A-9細胞、MPC11細胞
HSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
RTE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞
231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞
NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
U14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
KASUMI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞
HC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
MDAMB175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞
JiyoyeP-2003細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M14細胞、B5537SKIN細胞、Panc813細胞
HOP62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
BNL CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
H-2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF126細胞、MDA231-LM2-4175細胞、TF1細胞
H4-IIE-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
32D.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞
NCI-H441 epithelioid cells人肺腺癌細胞系
MS-751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
C33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2B4細胞、BCaP 37細胞、OVCAR-10細胞
JTC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 292 Clone A 141B1細胞、Human Embryonic Skin細胞、NB9細胞
RMa-bm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26WT細胞、Rin-M-5F細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
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