"NCI-H508 epithelioid cells人結(jié)腸直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
IA-LM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-19Lu細(xì)胞、H2009細(xì)胞、H-220細(xì)胞
CT-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞
NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞
細(xì)胞生長:貼壁
NCI-H508 epithelioid cells人結(jié)腸直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對其進(jìn)行檢測,而且它對細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
MN 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H719細(xì)胞、639-V細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞
P388.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKHEP1細(xì)胞、BT 549細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞
MDCK-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu-65細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、HCC94細(xì)胞
BT.549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1755細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、DV90細(xì)胞
H-676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞、H1238細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H508 epithelioid cells人結(jié)腸直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
HCMEC(BL12-H)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM-5A細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞
D562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-PaCa-2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞
PY8119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細(xì)胞、LN382細(xì)胞、BC-022細(xì)胞
UPCI:SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha-TC1.6細(xì)胞、HP615細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞
NCIH446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞
S3-HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-five細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞
1E8-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞
159 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細(xì)胞、H526細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞
H-1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞、IHH4細(xì)胞
NCI-H508 epithelioid cells人結(jié)腸直腸腺癌細(xì)胞系
NT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T1-73細(xì)胞、C 643細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞
T/GHA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞
ACC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH226細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞
MDA415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2135細(xì)胞、A 375細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞
Line 207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1806細(xì)胞、BC-022細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞
LTEPa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-484細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、MADB106細(xì)胞
LTEPa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-484細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、MADB106細(xì)胞
NCIH2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH-2細(xì)胞、RH-30細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞
MT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAC細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞、BBE細(xì)胞
SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞
293T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-64細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞、SMA560細(xì)胞
NCI-H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1610細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞、HFL1細(xì)胞
NCI-HUT-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR-146細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞、H-1869細(xì)胞
GM17219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159細(xì)胞、BT483細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞
HFL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞
108CC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW 42細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞、RT 112細(xì)胞
SK-N-BE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ-521細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞
PC.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NM-C細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞
SK-NEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞
PANC0203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞
SK-MEL-2-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VE細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞
U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞
OCUM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-157細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞
McG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞
LCLC103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-S細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞
NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞
SCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞
HGC-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLS細(xì)胞、H510細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞
OCILY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞
CHO-Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞
JB6 [Mouse]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞、ST-2細(xì)胞
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
SUM-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG 9細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞
COLO 206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA 802細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞
LS174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung-65細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞
SK-Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞
GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞
T9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801D細(xì)胞、CWR22-R1細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞
HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S16細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞
SKGT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEND細(xì)胞、HCC15細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞
GBCSD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx2細(xì)胞、IGROV細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞
NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞
SUP-B15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92.05細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞
PANC 1005細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEP2D細(xì)胞、Psi-2-DAP細(xì)胞、JVM-3細(xì)胞
Colon 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-31細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞、SkMel31細(xì)胞
MXI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earles's cells細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞
JEG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞
NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞
RPMI-2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-021細(xì)胞、NHLF細(xì)胞、H-1648細(xì)胞
NCI-H508 epithelioid cells人結(jié)腸直腸腺癌細(xì)胞系
SEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a2細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞、WM115細(xì)胞
TR146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、H1623細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞
TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:tdott細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞
D562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-PaCa-2細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞、hA549細(xì)胞
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