"L-540 Cell:人霍奇金淋巴瘤細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:霍奇金淋巴瘤;女性
N-2a細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞
VMRCLCD細胞系相關產(chǎn)品:L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
OVCAR 4細胞系相關產(chǎn)品:TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞
CCD 841 CoTr細胞系相關產(chǎn)品:COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
L-540 Cell:人霍奇金淋巴瘤細胞系
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Z138細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞
HEC-1-A細胞系相關產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞
JHH2細胞系相關產(chǎn)品:DMS 153細胞、KCL22細胞、675T細胞
LA-N-1細胞系相關產(chǎn)品:HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
DoTc2-4510細胞系相關產(chǎn)品:MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
細胞生長特性:懸浮
L-540 Cell:人霍奇金淋巴瘤細胞系
細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
18G3.cl 1細胞系相關產(chǎn)品:SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞
MDCC-MSB-1細胞系相關產(chǎn)品:C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞
MRC-9細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
ABE8.1/2細胞系相關產(chǎn)品:Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞
MOLT3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞
NIH:OVCAR-5細胞系相關產(chǎn)品:Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞
RL-952細胞系相關產(chǎn)品:B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
L-540 Cell:人霍奇金淋巴瘤細胞系
Fetal Bovine Heart Endothelial細胞系相關產(chǎn)品:HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞
HPAF/CD18細胞系相關產(chǎn)品:MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
Caki2細胞系相關產(chǎn)品:BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞
SMMC-7721細胞系相關產(chǎn)品:CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
CL1細胞系相關產(chǎn)品:BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
RD細胞系相關產(chǎn)品:MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞
CHOK1細胞系相關產(chǎn)品:SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞
OVCAR420細胞系相關產(chǎn)品:SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞
210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞
NCI-H1694細胞系相關產(chǎn)品:H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞
UMNSAH/DF#1細胞系相關產(chǎn)品:SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞
MLOY4細胞系相關產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
KRC Y細胞系相關產(chǎn)品:L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
EA.hy 926細胞系相關產(chǎn)品:RAMSCs細胞、SKMel-5細胞、HEI-193細胞
3T3 Swiss Albino細胞系相關產(chǎn)品:OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞
2B4-L細胞系相關產(chǎn)品:SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞
KOPN8細胞系相關產(chǎn)品:HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞
MV-4-11細胞系相關產(chǎn)品:OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
AM38細胞系相關產(chǎn)品:RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞
UACC-893細胞系相關產(chǎn)品:HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
RCSMC細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR.8細胞、H-2073細胞、LAN-5細胞
RL-95-2細胞系相關產(chǎn)品:SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞
NCI-H1048細胞系相關產(chǎn)品:TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞
MFE-296細胞系相關產(chǎn)品:PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞
JeKo-1細胞系相關產(chǎn)品:UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
373MG細胞系相關產(chǎn)品:624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
HCC-2279細胞系相關產(chǎn)品:HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞
D283MED細胞系相關產(chǎn)品:Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞
HARAB細胞系相關產(chǎn)品:EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
Hep G2-Luc細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
HCC2935細胞系相關產(chǎn)品:GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞
BJA-B1細胞系相關產(chǎn)品:Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞
OCI/AML-5細胞系相關產(chǎn)品:EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞
H747細胞系相關產(chǎn)品:SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
HuO9細胞系相關產(chǎn)品:SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
NIE-115細胞系相關產(chǎn)品:MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞
SK-N-BE-2c細胞系相關產(chǎn)品:H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞
MDA-MB-468細胞系相關產(chǎn)品:V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞
MUS-M1細胞系相關產(chǎn)品:KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
MN-60細胞系相關產(chǎn)品:Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
MES 23.5細胞系相關產(chǎn)品:C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
FU-OV-1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH526細胞、MDA-MB-231-GFP細胞、U-CH1細胞
EOMA細胞系相關產(chǎn)品:P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
L-540 Cell:人霍奇金淋巴瘤細胞系
AMO1細胞系相關產(chǎn)品:RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
NTera 2細胞系相關產(chǎn)品:N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞
T47D細胞系相關產(chǎn)品:AR-42J細胞、Hs895T細胞、Hs888T細胞
NTERA-2 cl.D1細胞系相關產(chǎn)品:GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞
COLO-679細胞系相關產(chǎn)品:TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞
HCC2157細胞系相關產(chǎn)品:IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
BLO11細胞系相關產(chǎn)品:H508細胞、H522細胞、C918細胞
Institute for Medical Research-90細胞系相關產(chǎn)品:CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞
U-2OS細胞系相關產(chǎn)品:RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關產(chǎn)品:H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
BJ1細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
M-20細胞系相關產(chǎn)品:HCCC9810細胞、3T3-442A細胞、HOEC細胞
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關鍵字: L-540 Cell:人霍奇金淋巴瘤細胞系
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