"MN-60 Cell:人B細胞白血病細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:B細胞白血??;男性
EAHY-926細胞系相關產(chǎn)品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
ESC細胞系相關產(chǎn)品:Y-79細胞、HS-294T細胞、HCe-8693細胞
CEMC1細胞系相關產(chǎn)品:DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞
NS1細胞系相關產(chǎn)品:H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MN-60 Cell:人B細胞白血病細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CTLA4Ig-24細胞系相關產(chǎn)品:HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞
INS-1E細胞系相關產(chǎn)品:AA-Mel細胞、Ramos (RA)細胞、PL-45細胞
DK-MG細胞系相關產(chǎn)品:CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞
IM95細胞系相關產(chǎn)品:CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
HNE2細胞系相關產(chǎn)品:SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
細胞生長特性:懸浮
MN-60 Cell:人B細胞白血病細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
Bovine ENDometrial cells細胞系相關產(chǎn)品:N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關產(chǎn)品:YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
OSA細胞系相關產(chǎn)品:SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞
HP615細胞系相關產(chǎn)品:Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
EHEB細胞系相關產(chǎn)品:KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞
SW-756細胞系相關產(chǎn)品:CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
IALM細胞系相關產(chǎn)品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞
MN-60 Cell:人B細胞白血病細胞系
SNU182細胞系相關產(chǎn)品:U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
NMCG-1細胞系相關產(chǎn)品:GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞
Jurkat細胞系相關產(chǎn)品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
SW982細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞
B16-F0細胞系相關產(chǎn)品:Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞
H2405細胞系相關產(chǎn)品:BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞
HUCCT1細胞系相關產(chǎn)品:Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關產(chǎn)品:GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
HSAEC1-KT細胞系相關產(chǎn)品:SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞
HSAEC1-KT細胞系相關產(chǎn)品:SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞
AR4IP細胞系相關產(chǎn)品:D341 Med細胞、IEC 6細胞、SUDHL-16細胞
C3H10T1/2細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞
P1-Raji細胞系相關產(chǎn)品:RCC-10RGB細胞、MG-HU-3細胞、OCI-AML-5細胞
WC00044細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
RBL.2H3細胞系相關產(chǎn)品:BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞
MNNG/HOS Cl #5細胞系相關產(chǎn)品:Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞
SHEP1細胞系相關產(chǎn)品:SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
HEL299細胞系相關產(chǎn)品:SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
COLO 205細胞系相關產(chǎn)品:H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關產(chǎn)品:CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
Hs 688(A).T細胞系相關產(chǎn)品:SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
VERO C 1008細胞系相關產(chǎn)品:IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞
hEEC細胞系相關產(chǎn)品:Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞
NBL-S細胞系相關產(chǎn)品:CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關產(chǎn)品:T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
D-283 Med細胞系相關產(chǎn)品:KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
HT144-mel細胞系相關產(chǎn)品:MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞
NCIH2196細胞系相關產(chǎn)品:HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
YT細胞系相關產(chǎn)品:LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞
NCI-H295R細胞系相關產(chǎn)品:OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞
COLO-699細胞系相關產(chǎn)品:LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
WC00079細胞系相關產(chǎn)品:A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
SUM52細胞系相關產(chǎn)品:PC-12細胞、NCIH2081細胞、NCI-H524細胞
H-1048細胞系相關產(chǎn)品:3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
WBF344細胞系相關產(chǎn)品:HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
Walker/LLC-WRC 256細胞系相關產(chǎn)品:GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞
HEK293-H細胞系相關產(chǎn)品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
Panc 02.03細胞系相關產(chǎn)品:HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞
BE2C細胞系相關產(chǎn)品:H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
MDA-MB-361細胞系相關產(chǎn)品:LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
MCA-205細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞
HCC9724細胞系相關產(chǎn)品:BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞
VERO76細胞系相關產(chǎn)品:AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
MN-60 Cell:人B細胞白血病細胞系
Huh-7細胞系相關產(chǎn)品:MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
LCLC-103H細胞系相關產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
LTEP-a2細胞系相關產(chǎn)品:S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞
RPMI No. 1846細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞
HSC-6細胞系相關產(chǎn)品:PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
UM2細胞系相關產(chǎn)品:Pt K1 (NBL-3)細胞、MDA-MB-435S細胞、Molm 14細胞
MES-23.5細胞系相關產(chǎn)品:P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
HUT 226細胞系相關產(chǎn)品:HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
L cell細胞系相關產(chǎn)品:C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞
HR8348細胞系相關產(chǎn)品:DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
SJSA1細胞系相關產(chǎn)品:L2細胞、CL34細胞、SHG44細胞
Tb1.Lu細胞系相關產(chǎn)品:CPA47細胞、MLMEC細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
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關鍵字: MN-60 Cell:人B細胞白血病細胞系
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