"P388D1 Cell:小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
3T3 L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20SV細(xì)胞、IEC6細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞
Ca-Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM1215細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞、L-1210細(xì)胞
PCI-4.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-R1細(xì)胞、D-283細(xì)胞、DMS114細(xì)胞
Kupffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-729-T細(xì)胞、HN 4細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
P388D1 Cell:小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞系
細(xì)胞消化過程總結(jié):其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCaP 37細(xì)胞、H-1944細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞
Porcine Kidney-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801C細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞
10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1A細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞
K562/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCMS細(xì)胞、PG-4細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞
A-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮
P388D1 Cell:小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW039細(xì)胞、UMR106細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞
MCF.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP1細(xì)胞、HCEC細(xì)胞、AGS細(xì)胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT22細(xì)胞、U 266細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞
SUM-149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞
Hi5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JC細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞
Plaepi 34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA PCa 2b細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞、CA922細(xì)胞
b.End3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu 6細(xì)胞、C1498細(xì)胞、8305-C細(xì)胞
P388D1 Cell:小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞系
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
hEM15A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞
KGN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SO-RB50細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞
THC-8307細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 123細(xì)胞、SW-403細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞
COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞
NCI-H1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC26細(xì)胞、H2030細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞
NCIH196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES 2細(xì)胞、AZ521細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞
SK-Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GMK,BSC-1細(xì)胞、YAC細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞
BAC1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD-2細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、VB細(xì)胞
SK-Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞
HEK-293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞
Hs870T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JG細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞
UMNSAH-DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC10細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞
MRC-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞、HO8910細(xì)胞
G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞
HEK293-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞
HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F98細(xì)胞、H-1734細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞
EOC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-10細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞
COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、GOTO細(xì)胞
THP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR420細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞、High Five細(xì)胞
QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC(Human Schwann)細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞
PLC-PRF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH345細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞、207細(xì)胞
Hk-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B5537SKIN細(xì)胞、BT20細(xì)胞、PC-10細(xì)胞
RC-K8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-FT細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞、KLN205細(xì)胞
Wistar Institute-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK(15)細(xì)胞、WM115細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞
Henrietta Lacks cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞
NCIH1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM1細(xì)胞、H295R-S1細(xì)胞、HCC9204細(xì)胞
HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞
Hs_578t細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZC-1細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞
BE2-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO680N細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、SW1222細(xì)胞
A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞
RS4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1688細(xì)胞、H-292細(xì)胞、C-643細(xì)胞
U-2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 839.T細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞
1301細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cell line細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞
NCIH1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FET細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞
NCI-SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-441細(xì)胞、MKN 28細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞
HPAF/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUS-M1細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞
Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-UMC-11細(xì)胞、Saos2細(xì)胞、GT39細(xì)胞
C4-2 Bone metastatic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-82細(xì)胞、SW-527細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞
COR L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-1細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞
H9c2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU_145細(xì)胞、HOS(TE85)細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞
RCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549細(xì)胞、KPL1細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞
P388D1 Cell:小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞系
OP-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB-106細(xì)胞、RERF-LCMS細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞
IHH-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE CA PJ34細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞、L 132細(xì)胞
DU 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Lens-124細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞
HCGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H-1細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞
CEMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1395細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞
HNE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK ES 01細(xì)胞、SK 1細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞
D10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞、AAV293細(xì)胞
6-T CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:1.1B4細(xì)胞、TR146細(xì)胞、Walker256細(xì)胞
LM-TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTC細(xì)胞、ID8細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞
NTera 2/cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1155細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞
TC-1[JHU-1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞
SCC 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroC1008細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞
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