"Hca-F Cell:小鼠肝癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:肝癌
Normal Rat Kidney-52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138-MG細胞、MDA-MB157細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞
HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞
Hs 606細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞
HFTF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Hca-F Cell:小鼠肝癌細胞系
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞
4-1st細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞
CWR22-Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞
Chinese Hamster Ovary細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs934T細胞、SKBR-3細胞、MGC-803細胞
H-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞
細胞生長特性:貼壁
Hca-F Cell:小鼠肝癌細胞系
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
T 98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
CV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞
GLAG-66細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
JHH-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671細胞、Hs_578t細胞、HBE 135-E6E7細胞
Hca-F Cell:小鼠肝癌細胞系
EM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
P3X63Ag8653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞
PBMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞
PC-3M 2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
451-LU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞
NK92-MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞
DC 2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞
COLO-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞
Ca9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C643細胞、MV-4-11細胞、NCIH128細胞
LNCaP clone FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞
IR983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞
HPAF-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
32D:cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage OL細胞、LS174細胞、HepG2/C3A細胞
Hs839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞
HFLS-RA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞
HT 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞
MLE 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞
NCI-H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-B3細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、CORL279細胞
Panc 3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞
HEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞
CA-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞
TCMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
CHO-ori細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
DH-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
JB-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322細胞、NCIH740細胞、COLO 824細胞
J 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
BT-325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
VERO C 1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞
HCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞
MA-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
CEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
L78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞
PLA801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388-D1細胞、LU-65M細胞、LTEP-a-2細胞
MDA-MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞
WTRL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞
3T3NIH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞
HEK 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞
Hca-F Cell:小鼠肝癌細胞系
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞
HA1800細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞
Line 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞
H-1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
GM03570細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞
CAL 51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
GLC-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞
OE-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞
Walker/LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞
BTI-Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞
D283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL3細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、Det 562細胞
Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細胞、LL2細胞、HEK-293 c18細胞
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