"K7M2-WT Cell:小鼠骨肉瘤成骨細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：骨肉瘤；肺轉(zhuǎn)移；雌性；BALB/c
HMEC細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)-M17細胞、SKGT4細胞、QGP 1細胞
NCI-H-82細胞系相關產(chǎn)品：BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞
B-104細胞系相關產(chǎn)品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
HCC-1500細胞系相關產(chǎn)品：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
K7M2-WT Cell:小鼠骨肉瘤成骨細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CTV-1細胞系相關產(chǎn)品：P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞
SW-1116細胞系相關產(chǎn)品：CL1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、MODE-K細胞
SNU620細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞
MC-26細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1428細胞、C3A細胞、Hs 683細胞
Fox/NY細胞系相關產(chǎn)品：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
細胞生長特性：貼壁
K7M2-WT Cell:小鼠骨肉瘤成骨細胞系
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
BCaP 37細胞系相關產(chǎn)品：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞
SRS-82細胞系相關產(chǎn)品：BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞
MN9D細胞系相關產(chǎn)品：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
SEG-1細胞系相關產(chǎn)品：H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
MOLP2細胞系相關產(chǎn)品：MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞
U-118-MG細胞系相關產(chǎn)品：KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞
ARO細胞系相關產(chǎn)品：2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞
K7M2-WT Cell:小鼠骨肉瘤成骨細胞系
OVCAR.4細胞系相關產(chǎn)品：CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
HCC1833細胞系相關產(chǎn)品：HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
ROS-17/2.8細胞系相關產(chǎn)品：MDA2B細胞、COLO 824細胞、GM03570E細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞
SUDHL-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞
COLO 699細胞系相關產(chǎn)品：TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞
JB6Cl30細胞系相關產(chǎn)品：MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞
H-1792細胞系相關產(chǎn)品：Detroit 562細胞、NTERA-2 clone D1細胞、HuPT3細胞
GM02219細胞系相關產(chǎn)品：KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
GM02219細胞系相關產(chǎn)品：KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
A375.S2細胞系相關產(chǎn)品：DMS-153細胞、NH6細胞、NOZAWA細胞
H-1417細胞系相關產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
MASMC細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
HDF-a細胞系相關產(chǎn)品：MDA-330細胞、HCC-38細胞、MILE SVEN 1細胞
A-10細胞系相關產(chǎn)品：Co-115細胞、CF-PAC1細胞、SJ-RH30細胞
Hs 675.T細胞系相關產(chǎn)品：PanC1細胞、KYSE-270細胞、NHEK細胞
NCI-H711細胞系相關產(chǎn)品：P3/X63/Ag8細胞、BEL-7405細胞、EoL-1-cell細胞
MPP 89細胞系相關產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關產(chǎn)品：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
RCK8細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
746T細胞系相關產(chǎn)品：MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關產(chǎn)品：EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞
EBTr細胞系相關產(chǎn)品：RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞
GM03571細胞系相關產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
C26細胞系相關產(chǎn)品：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
NCIH2227細胞系相關產(chǎn)品：OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞
MLA144細胞系相關產(chǎn)品：HCA7細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、Scott and White No. 13細胞
WM 2664細胞系相關產(chǎn)品：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞
TE353.SK細胞系相關產(chǎn)品：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞
L(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
RT-112細胞系相關產(chǎn)品：C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
Tu 177細胞系相關產(chǎn)品：KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞
T84細胞系相關產(chǎn)品：A-2780細胞、KU 812細胞、GTL16細胞
UACC-893細胞系相關產(chǎn)品：HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
M07e細胞系相關產(chǎn)品：BS-C-1細胞、SW 1271細胞、LTEPsm細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關產(chǎn)品：MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
hESC細胞系相關產(chǎn)品：BCAP37細胞、TE12細胞、174xCEM.T2細胞
TE7細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
MNNG-HOS細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞
CF-1 MEF細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-62細胞、RM1細胞、NCI-H-82細胞
H-2405細胞系相關產(chǎn)品：Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
LS 123細胞系相關產(chǎn)品：LS1034細胞、GRSL細胞、YTMLC-90細胞
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞
K7M2-WT Cell:小鼠骨肉瘤成骨細胞系
NCIH526細胞系相關產(chǎn)品：Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
NR8383.1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞
Hs294細胞系相關產(chǎn)品：HIT細胞、COLO 201細胞、MDA-MB435細胞
GL-261細胞系相關產(chǎn)品：Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞
SCL-1細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞
IMR-90細胞系相關產(chǎn)品：LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞
HIT.T15細胞系相關產(chǎn)品：M3 Clone M-3細胞、H7721細胞、Capan 1細胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞系相關產(chǎn)品：H-1623細胞、H-719細胞、OVSAHO細胞
HuCC-T1細胞系相關產(chǎn)品：HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞
RT-BM 1細胞系相關產(chǎn)品：B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞
NIH 3T6細胞系相關產(chǎn)品：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
H-1882細胞系相關產(chǎn)品：IPECJ2細胞、M21細胞、REC-1細胞
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關鍵字： K7M2-WT Cell:小鼠骨肉瘤成骨細胞系
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