"MKN74 Cell:人胃癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：胃癌；女性
MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞
TCam 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320-HSR細胞、OCI-Ly 7細胞、LNT-229細胞
CNE2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞
H341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MKN74 Cell:人胃癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞
alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞
MIA Paca2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-28細胞、rRTEC細胞、BL2141細胞
Tb 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
MLE 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞
細胞生長特性：貼壁
MKN74 Cell:人胃癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
H-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞
MCA 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1417細胞、Vero-E6細胞、SCL1細胞
NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞
Hs 895 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP-70細胞、THP-1細胞、MLTC-1細胞
alpha TC1.6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞
WB-F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
MKN74 Cell:人胃癌細胞系
SKES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
AgC11x3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞
KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
A-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192A細胞、NPA 87細胞、SN4741細胞
hFOB 1.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
HT-55細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
Colo741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞
P3HR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞
SUM-159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683細胞、OCI-LY-3細胞、LC2/Ad細胞
OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
L Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞
Fu97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
253JB-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
RPMI 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞
NW-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag1.2.3細胞、BEAS-2B細胞、Mevo細胞
KY-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B78細胞、H1688細胞、COV362細胞
BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
SNU251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 513細胞、L-Wnt-3A細胞、AN3-CA細胞
PNT1/A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
HCC-94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞
LWnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
PANC-08-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102細胞、JROECL21細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞
MCF.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP1細胞、HCEC細胞、AGS細胞
BHK 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-69細胞、WI38細胞、H-292細胞
MRC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-1細胞、DSL6A/C1細胞、PCI-4B細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
NCIH2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞
J774 A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞
Hu-P-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV362細胞、697細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞
Pro-Lec1.3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞
SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞
LU-65M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE19細胞、LL/2細胞、NCIH1436細胞
WM-239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
LA795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞
MV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
NGP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
MKN74 Cell:人胃癌細胞系
HCC827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞
P31/FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2A細胞、NFS-60細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞
Ramos-RA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞
SW-948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞
MS 751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞
28SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞
FOXNY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞
QG-56細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞
GM03671C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞
HuT 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞
WI38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH748細胞、RMa-bm細胞、HCC-1500細胞
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