"TE-13 Cell:人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:食管鱗癌;男性
NRK-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL 28細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞
NALM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA)細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞、CTV1細(xì)胞
HCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH522細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞、PLC細(xì)胞
Kit225 K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780細(xì)胞、PA12細(xì)胞、NCI-H508細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
TE-13 Cell:人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題:可以這樣說,對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題,可以非常肯定地說,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問題就是,細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對(duì)比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步,對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外,還有一個(gè)更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài),不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長,及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Z-138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H838細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞
GM17219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159細(xì)胞、BT483細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞
HM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1143細(xì)胞、P388D1細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞
H69/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo 59J細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞
NBL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC-2細(xì)胞、Simpson細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
TE-13 Cell:人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
NPA'87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis-Lung細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞、87 MG細(xì)胞
Vero from pool #76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-3細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞
TGW-nu-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞
PG-BE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞、H510A細(xì)胞
SupT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB611細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞
HOS TE 85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293AD細(xì)胞、LI7細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞
HPAF-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞
TE-13 Cell:人食管癌細(xì)胞系
hFOB 1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞
NCI-H526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞
U-118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP4細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞、NB-9細(xì)胞
Hepa 1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2122細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞、OCM1細(xì)胞
SU-DH-L5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞、EBTr細(xì)胞
67NR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞
COLO678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30 OHK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞、H9細(xì)胞
Pa14C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD 1細(xì)胞、HL7702細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞
RPTEC/TERT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞
KMS11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞
TCC-SUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2/D1細(xì)胞、COLO824細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞
HEL-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞
OVISE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細(xì)胞、H2087細(xì)胞、HM細(xì)胞
QGY-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞、U20S細(xì)胞
Nittby-Salford 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAK+/+細(xì)胞、H-1522細(xì)胞、Dx5細(xì)胞
Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞
MN9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251n細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞、HAPI細(xì)胞
A 2780 CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-620細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞
NCI-SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIC細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞
YTMLC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS76細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞
Calu3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞
B16 F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-704細(xì)胞、253JBV細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞
RPMI-7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T HEECs細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞、Hs281T細(xì)胞
Hs606細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH7細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx-147細(xì)胞、H510A細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞
FHCRC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant-522細(xì)胞、SupT1細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞
NCI-H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞
RL952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-4:11細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞
NCIH187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774.A1細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞
Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞
624mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞
H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 934.T細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞
SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞
MOLT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞
X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MX1細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞、H-1581細(xì)胞
TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞
TE32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞
GES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞
OC-3-VGH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-6細(xì)胞、PJ34細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞
UMNSAH-DF 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOL1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞
VM-CUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC4細(xì)胞、MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞、SW-948細(xì)胞
MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞
TE-13 Cell:人食管癌細(xì)胞系
SW1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69細(xì)胞、SF539細(xì)胞、TE1細(xì)胞
NIH:OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca9-22細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞
HSC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 900細(xì)胞、AR42J細(xì)胞、H-510A細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
Hs294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa-2b細(xì)胞、DanG細(xì)胞、J-82細(xì)胞
DU145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKN細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞
U-343-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS-27細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞、H1568細(xì)胞
SUDHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞
RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞
DSL-6A-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh 74細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞、HMEC細(xì)胞
Colo-678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15WT細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞
DSL-6A-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh 74細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、L- cell細(xì)胞
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關(guān)鍵字: TE-13 Cell:人食管癌細(xì)胞系
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