"HKC Cell:人胚腎小管上皮細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:胚胎;腎小管;上皮細胞
RL-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266S細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、MDA468細胞
M210B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞
CL34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
H-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190細胞、HT1197細胞、CEM C7細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HKC Cell:人胚腎小管上皮細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
huH 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞
U138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞
NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
JEG-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295R細胞、GM02131A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞
細胞生長特性:貼壁
HKC Cell:人胚腎小管上皮細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
COLO-320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞
CNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPBALL細胞、SUSM1細胞、IA-LM細胞
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
U-226AR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞
Hs 606.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
HKC Cell:人胚腎小管上皮細胞系
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞
FOXNY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
PL9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
NB4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞
Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞
SKLU01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
CAL 85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞
MIA-PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞
MIA-PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞
HFTF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞
RenCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞
MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞
HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞
Daoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB-17細胞、UMRC-2細胞、Rat-2細胞
LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC-Y細胞、Tj-905細胞、CT-26細胞
COLO206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞
L 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞
HeLaS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞
NCI-H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
ECC 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞
OVCAR 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞
Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞
NCTC-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞
Mouse Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC1細胞、SNU-484細胞、MDA-231細胞
JIMT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
NCI-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
KRC-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
GM00637I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH292細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、HS-940-T細胞
RA-FLSs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞
H-1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞
BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞
GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞
138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞
Pt K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞
BAR-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞
H-2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sf21細胞、KMB17細胞、Huh-7細胞
SMMC-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
SK-N-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞
KYSE-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 38細胞、NCI-H2108細胞、GM02132C細胞
HKC Cell:人胚腎小管上皮細胞系
EMT-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL2細胞、MCM細胞、GA-10細胞
293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞
KASUMI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞
rHSC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
AgC11x3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞
NEC-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞
Ra No. 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞
HCC-1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
NCI-H1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT3細胞、P 3 HR 1細胞、CCD 1112SK細胞
NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細胞、TE 85.T細胞、DHL4細胞
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