異硫氰酸胍
異硫氰酸胍
CAS: 593-84-0
別名：硫氰酸胍
聯(lián)系電話：027-87738695/15387162512 QQ:664219562 付經(jīng)理
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Guandine throcyanate 簡稱 GITC
分子式:CH5N3·HSCN 分子量:118.16
外觀:白色結(jié)晶 熔點:115-120℃ PH(4%水溶液):4.5-7.0
紫外吸收(300nm,6M):≤0.1 abs unit
紫外吸收(410nm,6M):≤0.05abs unit
干燥失重:≤0.5%
用途：用于變性裂解細胞；提取RNA和DNA。無RNA酶和DNA酶活性 TRIzol是一種新型總RNA抽提試劑，可以直接從細胞或組織中提取總RNA。其含有苯酚、異硫氰酸胍等物質(zhì)，能迅速破碎細胞并抑制細胞釋放出的核酸酶。
異硫氰酸胍法提取同時提取DNA病毒和RNA病毒核酸
隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展，基因診斷成為檢測動物疫病最準確而有效地手段，進行基因診斷的過程中，病毒核酸的提取是進行檢測的前提條件，核酸提取的質(zhì)量也影響檢測的準確性。
當前，動物病毒核酸提取方法主要有經(jīng)典Trizol提取法和以Trizol作為裂解液的硅膠模柱式提取法兩種方法。經(jīng)典Trizol提取法過程繁瑣、周期長、提取效率低、技術(shù)要求高，以Trizol作為裂解液的硅膠模柱式提取法成本較高、提取RNA的質(zhì)量不高、且只能提取RNA病毒。
一種同時提取血清、雙拭子中動物DNA病毒和RNA病毒核酸的方法，包括步驟：對待提取物使用異硫氰酸胍裂解液裂解；硅膠膜吸附RNA；洗液Ⅰ除去雜蛋白；洗液Ⅱ洗去雜質(zhì)；DEPC水洗脫核 酸；上述異硫氰酸胍裂解液包括3-7M異硫氰酸胍、0.6%-1.0%TriTon-100、30-50mM Tris-Cl、5-15mM DTT、60-90μg/mL蛋白酶K、10-30mM EDTA，PH在4.3-4.6。
上述洗液Ⅰ包括5-6M鹽酸胍，53-59%無水乙醇，K70-90μg/mL蛋白酶，PH在6.4-6.6；上述洗液Ⅱ包括70-80%乙醇。
進一步地，上述異硫氰酸胍裂解液包括5M異硫氰酸胍、0.8%TriTon-100、40mM Tris-Cl、10mM DTT、80μg/mL蛋白酶K、20mM EDTA，pH在4.5。進一步地，上述洗液Ⅰ包括5.5M鹽酸胍，56%無水乙醇，80μg/mL蛋白酶K，PH在6.5。進一步地，上述洗液Ⅱ包括75%乙醇。
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