"U-138MG Cell:人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:星形細(xì)胞瘤;男性
TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞
TM4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UC-3細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞、TE-11細(xì)胞
C4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞
Caco-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、HLF細(xì)胞、J774細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
U-138MG Cell:人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中相關(guān)問(wèn)題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過(guò)高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤(pán)之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級(jí),必須為T(mén)issue culture grade之DMSO,其本身即為無(wú)菌狀況,次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過(guò)濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20°C不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時(shí),細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
PLA 802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7ADR細(xì)胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、MGH-UI細(xì)胞
3D4/21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞
SKGT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEND細(xì)胞、HCC15細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞
MHCC-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343細(xì)胞、LL2細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞
HCC2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL2細(xì)胞、MXI細(xì)胞、SW1783細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
U-138MG Cell:人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
LIM1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞
HCC-1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞
CEMx721.174.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細(xì)胞、TE-13細(xì)胞、2BS細(xì)胞
NCI-H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞
TE353.SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-3細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、BC-021細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞
DU 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞
U-138MG Cell:人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A20細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞、SC細(xì)胞
hTERT-RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs821T細(xì)胞、STTG1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞
MM96L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-767細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞、IEC18細(xì)胞
RL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC90細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞、C22細(xì)胞
A-172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 2細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞
HFL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA Paca2細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞
ECC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞
Ls-174-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H87細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞、RMS13細(xì)胞
Colon 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye (P-2003)細(xì)胞、Ramos細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞
Colon 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye (P-2003)細(xì)胞、Ramos細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞
AN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373MG細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞、HCM細(xì)胞
PAa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML2細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞、C-8161細(xì)胞
MDA-MB-175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2108細(xì)胞、SF767細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞
DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI6細(xì)胞、C22細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞
Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞、526細(xì)胞
BOWES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 24細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞
ABC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-852-T細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞
C643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VCaP細(xì)胞、CL1細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞
B/C3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1672細(xì)胞、HMC細(xì)胞、HNE3細(xì)胞
H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC109細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞
RPMI-1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1693細(xì)胞、LK2細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞
ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞
293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu 3細(xì)胞、SUM159細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞
MCF 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-GP細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞
CATHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB17細(xì)胞、GM 637細(xì)胞、GM 637細(xì)胞
H4-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-624細(xì)胞、CESS細(xì)胞、THEECs細(xì)胞
SF539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞
FOX-NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-875細(xì)胞、C8161細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞
KMM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12F細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞
NCI-H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞
SN12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H727細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞、TJ905細(xì)胞
MM.1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1419細(xì)胞、C-4I細(xì)胞、F36P細(xì)胞
SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU8686細(xì)胞、KG-1細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞
HDQP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tissue Culture-1細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞
PLA801-95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-292細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞、H841細(xì)胞
GA10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
NCIH1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THEECs細(xì)胞、118 MG細(xì)胞、RPMC細(xì)胞
DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、H838細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞
H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞
H-1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKC細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞
GA-10 clone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388.D1細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞
U-138MG Cell:人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞、EBC1細(xì)胞
NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-889細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞、AN3細(xì)胞
NE-4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-136細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞
SK MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞、RGCs細(xì)胞
451-LU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138 MG細(xì)胞、LY-R細(xì)胞、HOP92細(xì)胞
L 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE-1細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞、H711細(xì)胞
PC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞
CCD18Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE B-3細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞
LIXC002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML4細(xì)胞、Becker細(xì)胞、PC2細(xì)胞
SN4741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1.Lu細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞
CCC-HIE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293EBNA細(xì)胞、293 H細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞
K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786.O細(xì)胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞
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