"NP69SV40T Cell:人鼻咽上皮細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：鼻咽；上皮細胞；SV４０轉(zhuǎn)化
BEL-7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞
SL-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
Beta-TC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
TI-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NP69SV40T Cell:人鼻咽上皮細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
DLD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞
SR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1788細胞、CaEs17細胞、MALME.3M細胞
A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞
CaES-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞
BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞
細胞生長特性：貼壁
NP69SV40T Cell:人鼻咽上皮細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
Panc02-H0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
COLO 320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞
NCI-H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
CAOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞
SUM 190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC-1細胞、SH-SY5Y Parental細胞、HPAF-II/CD18細胞
RPE1-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞
NP69SV40T Cell:人鼻咽上皮細胞系
HCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
Raji細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
MCF-7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
HC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
OACP4 C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞
HEK-293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6細胞、FTC-133細胞、COLO 320DM細胞
VMM39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
HMSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP細胞、SNU-387細胞、KU.812細胞
HMSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP細胞、SNU-387細胞、KU.812細胞
MHCC 97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
RPMI 8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞
NCI N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
Jeko1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
H-660細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞
NALM 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
Hs695細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
RCC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞
RCC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞
CEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
L78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞
HL7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
M-1 myeloid leukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細胞、H69/P細胞、RAT2細胞
RBL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
RPMI.8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH250細胞、KYSE 50細胞、KMB 17細胞
Nthy ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞
HMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
HCC2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞
H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞
P31-FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞
BHK-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
CCD19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞
OC 316細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539 BT細胞、Nittby-Salford 1細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞
NCIH820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
Baby Hamster Kidney-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMC-11細胞、SW527細胞、HCC4006細胞
C4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞
GES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
NP69SV40T Cell:人鼻咽上皮細胞系
TPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞
U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞
HLEB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞、U266B1細胞
HT-55細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞
WM 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-OV-1細胞、N-2a細胞、BT325細胞
Eph4 1424細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDMEC細胞、RBMVEC細胞、LC-2-Ad細胞
HEK-293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK-2細胞、Reh細胞、SHG 44細胞
MCF-7/AdrR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞
H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-2664細胞、HcaF細胞、GM01232細胞
251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞
NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞
AN3-CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M20細胞、DH 82細胞、HMC細胞
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