"UPCI-SCC-090 Cell:人口腔鱗癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：舌鱗癌細胞；男性
H-226細胞系相關產品：RSC96細胞、CAL 62細胞、NCI-H28細胞
COC1/CDDP細胞系相關產品：UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞
NCI-H660細胞系相關產品：SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞
N-2a細胞系相關產品：SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
UPCI-SCC-090 Cell:人口腔鱗癌細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDA-MB-175細胞系相關產品：293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
CRFK細胞系相關產品：TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞
TOV-112細胞系相關產品：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
SUSM1細胞系相關產品：SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞
Emory University-2細胞系相關產品：ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞
細胞生長特性：貼壁
UPCI-SCC-090 Cell:人口腔鱗癌細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
HK-2 [Human kidney]細胞系相關產品：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞
MLOY4細胞系相關產品：PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
DF1細胞系相關產品：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞
RCC4細胞系相關產品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
SU86_86細胞系相關產品：HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞
HEL92.1.7細胞系相關產品：MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞
143 B細胞系相關產品：NCI-SNU-407細胞、ARO-81細胞、SKM-1細胞
UPCI-SCC-090 Cell:人口腔鱗癌細胞系
RS411細胞系相關產品：NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
IPLB-SF 21AE細胞系相關產品：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞
NCI-H2081細胞系相關產品：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
LC1細胞系相關產品：PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞
HT clone H9細胞系相關產品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
H-1048細胞系相關產品：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
DHL-2細胞系相關產品：Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
UWB1289細胞系相關產品：A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞
LAN6細胞系相關產品：TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞
LAN6細胞系相關產品：TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞
WEHI-3B細胞系相關產品：Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞
H-2405細胞系相關產品：Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
MCF-12A細胞系相關產品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
L-M[TK-]細胞系相關產品：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞
TSU-Pr1細胞系相關產品：H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞
786O細胞系相關產品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
ARIP細胞系相關產品：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
WM 451-Lu細胞系相關產品：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞
293 H細胞系相關產品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
A2780CP70細胞系相關產品：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞系相關產品：NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞
NCIH295R細胞系相關產品：TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
HEK.EBNA細胞系相關產品：NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞
CL1細胞系相關產品：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
HSC-4細胞系相關產品：RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
KM933細胞系相關產品：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
118 MG細胞系相關產品：HNE3細胞、LK-2細胞、B16/F10細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關產品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
B95.8細胞系相關產品：BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞
J774.A1細胞系相關產品：DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞
RPMI1788細胞系相關產品：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
High-5細胞系相關產品：NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞
V79-4細胞系相關產品：LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞
HRA-19細胞系相關產品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
RPMI7951細胞系相關產品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞
H220細胞系相關產品：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
THLE2細胞系相關產品：7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞
J111細胞系相關產品：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
COV 434細胞系相關產品：HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞
BeWo細胞系相關產品：SU-DHL-5細胞、TE-3A細胞、UM-UC-3細胞
GTL16細胞系相關產品：NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞
HO1N1細胞系相關產品：Case 3細胞、Clone M-3細胞、VMM5A細胞
SUSM-1細胞系相關產品：NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
UPCI-SCC-090 Cell:人口腔鱗癌細胞系
RPMI-1788細胞系相關產品：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
EFM192C細胞系相關產品：C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞
Human Hepatocyte Line 5細胞系相關產品：COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞
MKN1細胞系相關產品：MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞
MCF/Adr細胞系相關產品：BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
SKG3A細胞系相關產品：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
NPC-TW-039細胞系相關產品：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
HOC1細胞系相關產品：LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
SW-1990細胞系相關產品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞
Super Tube細胞系相關產品：SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞
COLO678細胞系相關產品：P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞
3T6細胞系相關產品：L cells細胞、P560細胞、MonoMac1細胞
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關鍵字： UPCI-SCC-090 Cell:人口腔鱗癌細胞系
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