"Nthy-ori 3-1 Cell:人甲狀腺正常細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：甲狀腺；SV４０轉化；女性
NCI-SNU-449細胞系相關產品：MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞
PANC-02-03細胞系相關產品：HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞
Caco-2/BBe 1細胞系相關產品：SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞
HOSEpiC細胞系相關產品：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Nthy-ori 3-1 Cell:人甲狀腺正常細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
GM07404A細胞系相關產品：SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞
SW-1353細胞系相關產品：AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞
LN299細胞系相關產品：Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞
A9細胞系相關產品：NCIH1688細胞、H-1573細胞、A-10細胞
C17細胞系相關產品：MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
細胞生長特性：貼壁
Nthy-ori 3-1 Cell:人甲狀腺正常細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
MA104細胞系相關產品：ONS-76細胞、MOLM16細胞、HSC1細胞
HPAEC細胞系相關產品：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
H184A1細胞系相關產品：28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞
NKL細胞系相關產品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞
BL1339細胞系相關產品：L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞
Mono-Mac-6細胞系相關產品：KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關產品：SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
Nthy-ori 3-1 Cell:人甲狀腺正常細胞系
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關產品：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞
SUM190細胞系相關產品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
MEF細胞系相關產品：OKAC1細胞、SNT-8細胞、C8-D1A細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關產品：H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
H711細胞系相關產品：IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞
D10G41細胞系相關產品：SUM-102細胞、AR4IP細胞、bEnd3細胞
FDCP-1細胞系相關產品：M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞
Calu6細胞系相關產品：Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞
H1404細胞系相關產品：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞
HEC1-B細胞系相關產品：HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞
NRK clone 52E細胞系相關產品：PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞
GDM1細胞系相關產品：Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞
NCI-522細胞系相關產品：SR細胞、He La細胞、TE14細胞
HSC-1細胞系相關產品：293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
HOS TE 85細胞系相關產品：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
L cells (TK-)細胞系相關產品：Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞
MMAc-Serum Free細胞系相關產品：OCI-Ly18細胞、TE-4細胞、KTCTL140細胞
LMTK-細胞系相關產品：ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞
NHRF細胞系相關產品：D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞
BHP10-3細胞系相關產品：A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關產品：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
HPAF-I細胞系相關產品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
RWPE-2細胞系相關產品：C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞
TW01細胞系相關產品：WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
HOC1細胞系相關產品：LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
EL-4細胞系相關產品：NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
HUTU80細胞系相關產品：SK-LMS-1細胞、IPECJ2細胞、PCI-SG231細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關產品：NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
L cell細胞系相關產品：C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞
CT26WT細胞系相關產品：RAW-264.7細胞、hRMECs細胞、P3JHR-1細胞
16-HBE14o細胞系相關產品：SN12-PM6細胞、HEC1-B細胞、P-388D1細胞
MDCK supertube細胞系相關產品：MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
D283-MED細胞系相關產品：MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞
NCIH526細胞系相關產品：Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
H-1417細胞系相關產品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
TT細胞系相關產品：IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞
OVCAR10細胞系相關產品：U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞
THPI細胞系相關產品：SK-N-BE(2C)細胞、NBL-12細胞、HS940細胞
Ly7細胞系相關產品：CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
LLC-PK-1細胞系相關產品：KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞
VMCUB1細胞系相關產品：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞
Hep 3B細胞系相關產品：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SNGM細胞、HEK 293 c18細胞
SMMC-7721細胞系相關產品：CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
Nthy-ori 3-1 Cell:人甲狀腺正常細胞系
HCEC-B4G12細胞系相關產品：AX-Mel細胞、MNNG細胞、H-1975細胞
LN382細胞系相關產品：526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞
C-26細胞系相關產品：NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
SKNBE(2c)細胞系相關產品：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞
BRL細胞系相關產品：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
J82 COT細胞系相關產品：TE-1細胞、Namalva細胞、NCIH196細胞
LLC-PK(1)細胞系相關產品：Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞
H1341細胞系相關產品：T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
DoTc2-4510細胞系相關產品：MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
IOSE 80細胞系相關產品：H2330細胞、NALM-6細胞、FHC細胞
SKGT2細胞系相關產品：Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞系相關產品：Ketr-3細胞、OVCAR-433細胞、IHH4細胞
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關鍵字： Nthy-ori 3-1 Cell:人甲狀腺正常細胞系
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