"UMNSAH/DF-1 Cell:雞胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
Hs 281.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-DM細(xì)胞、NCM460細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞
KP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832.Tc細(xì)胞、PAa細(xì)胞、NRCC細(xì)胞
HepaRG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
UMNSAH/DF-1 Cell:雞胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞凍存基本方法:1.細(xì)胞:選對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時(shí)前換液一次。2.計(jì)數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。4.分裝:分裝入無(wú)菌安剖中,每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。5.封口:用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時(shí)可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見(jiàn),把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時(shí)因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細(xì)胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開(kāi)紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒(méi)用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒(méi)了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤(pán)?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Kasumi 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2-11細(xì)胞、PC.3細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞
CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
Karpas-422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon 38細(xì)胞、T.T細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞
MV411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC7細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、PFSK細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
UMNSAH/DF-1 Cell:雞胚胎成纖維細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過(guò)程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維母細(xì)胞樣
NCI-H510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292 clone A141B1細(xì)胞、H209細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞
SK-MEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV173細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞
NCI-SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-9細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞、SNU423細(xì)胞
NCI-SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-78細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞、MH7A細(xì)胞
TGW細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞
L-Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E細(xì)胞、A-172細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞
NB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞
UMNSAH/DF-1 Cell:雞胚胎成纖維細(xì)胞系
LU-65M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE19細(xì)胞、LL/2細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞
CHO K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞
GM06141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-I細(xì)胞、THP 1細(xì)胞、NCI N87細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
FHC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELA-GFP細(xì)胞、T-24細(xì)胞、S91細(xì)胞
RGC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa.S3細(xì)胞、L- cell細(xì)胞、SW839細(xì)胞
CAL 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-4細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞、H1373細(xì)胞
UPCI-SCC-154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28/I2細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞、WM-115細(xì)胞
Hs888 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-4C細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞
Hs888 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-4C細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞
SK-N-BE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ-521細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞
P3-X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 2185細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞、H460細(xì)胞
SK-BR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS11細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞
ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞
Karpas 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-1細(xì)胞、AML-12細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞
WiDr/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞
GH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC090細(xì)胞、HCT15細(xì)胞、293T細(xì)胞
TE671/RD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB-F344細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞、SNU739細(xì)胞
Hs343T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon 26細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞、FAO-1細(xì)胞
UCD-MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-900細(xì)胞、L132細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞
M3 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMy2.CIR細(xì)胞、HN-6細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞
NCIH2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞
Jurkat clone A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2 (LLC1)細(xì)胞、RTMC細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞
H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞
SKMEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone 3細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞、RGC6細(xì)胞
LUDLU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9204細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞
HITT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、HR-1細(xì)胞
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞
SUM 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174T細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞
P3X63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞
NPC-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞
HGC-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLS細(xì)胞、H510細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞
COLO 320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE-2細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞
Renal Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP subline C4-2細(xì)胞、H9c2細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL1細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞
MCF7-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS-1細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞
A2780/Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT112細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞
CCD-841-CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞
BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞
SUM-159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞
MKN74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT20細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞
MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞
C32 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA-DX5細(xì)胞、C1R細(xì)胞、NGEC細(xì)胞
UMNSAH/DF-1 Cell:雞胚胎成纖維細(xì)胞系
253JBV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT549細(xì)胞、Hs 578.T細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞
HeLa.S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ND7/23細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、BT474細(xì)胞
Wien133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-CL-11細(xì)胞、BALL1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞
PNT1/A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞
HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞
C 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞
293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu 3細(xì)胞、SUM159細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞
HL 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 948細(xì)胞、B-104細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞
Panc_08_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-112CoN細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞
V 79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs 74 Int細(xì)胞、K 562細(xì)胞、AU-565細(xì)胞
HepG2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-102PT細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞
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