"U-87MG ATCC Cell:人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
RPMI 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
HRIF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
GM04679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
293-GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
U-87MG ATCC Cell:人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
GM00637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞
Caov-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO 11細胞、LUDLU 1細胞、SUM-52細胞
ROS 17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞
NUGC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
U-87MG ATCC Cell:人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
LED-WiDr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVOG細胞、H1404細胞、ARO-81細胞
MV-4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
HCC-1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞
PC 61 5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
NCI-H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
L02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1651細胞、NCI-H1435細胞、B958細胞
U-87MG ATCC Cell:人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
LK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞
NCIH208細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞
TE3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266B1細胞、HOSEpiC細胞、A172細胞
NCI-SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞
HC11 Mammary Epithelium細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F98細胞、H-1734細胞、4T1.2細胞
OSKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
KPL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-940-T細胞、C2BBe1細胞、MV 3細胞
NCI-H1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞
T-ALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
T-ALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
High5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞
TK 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞
MDAMB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞
GOS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞
JCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞
FHs74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞
KYSE520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞
UCD-MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞
SEG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
NKT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞
NCIH1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OP-9細胞、HO1-N1細胞、NCI H2106細胞
H-1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
GC-1spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
OPM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞
SKMEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞
H4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hmy.2 CIR細胞、PANC 203細胞、624細胞
ECV 304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL24細胞、NCI-H596細胞、THLE-2細胞
TYK-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
H295R-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞
PBMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞
HT22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞
LSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1703細胞、NIH 3T3細胞、CF-1 MEF細胞
NCI-H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞
NTC200細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB15細胞、SK-ES細胞、P815細胞
RGM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
NCIH345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞
NCI-SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞
HEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞
266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
C8-D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞
NCTC 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞
L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
U-87MG ATCC Cell:人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
Jurkat E6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
PE/CA-PJ-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
KP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
H-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
NCI-H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞
TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
SK Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 5細胞、MUG-Chor1細胞、SW-579細胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞
Hep 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞
KYSE 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞
MCF-7/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 62細胞、TE-32細胞、NCI-SNU-601細胞
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