"NCI-H865 Cell:人肺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
MDA-MB-435S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs_578t細胞、EoL-1 cell細胞、G402細胞
P3X63 Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
Hs 294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞
H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H865 Cell:人肺癌細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
bEnd.3[BEND3]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞
A 2780 CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-620細胞、SKNBE-1細胞、NCI-H1838細胞
CORL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞
NCIH1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
KMM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
NCI-H865 Cell:人肺癌細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
L-M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
H-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
NCI-H865 Cell:人肺癌細胞系
H-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞
CCD-112 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
130-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
A549-Taxol細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞
SU-86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
H-1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit 562細胞、NTERA-2 clone D1細胞、HuPT3細胞
WM 239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
MM96L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
MM96L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
SNK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
TGW-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞
KHYG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:no-11細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞、P30OHK細胞
LA-N-6(OAN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞
LL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
Cattle chondrocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞
HBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
T-47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞
CORL88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
786-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
SNT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞
LS123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞
NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
Hs739T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
Case 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞
SN4741細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞
526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-52細胞、LUDLU-1細胞、H548細胞
NHLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
Meat Animal Research Center-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞
DITNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES-1細胞、LU165細胞、HEK-AD293細胞
SCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
SW-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞
NG10815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
OCI-Ly 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞
L615細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
SACC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
MKN 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞
NBLAN5T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
P3X63Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞
VP 267細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞
SNGM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞
NCI-H865 Cell:人肺癌細胞系
CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞
My-La 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞
MN60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞
GM02132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
NCI-H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
HepG2-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
16HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞
CAL 120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞
TE-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4:11細胞、CHOS細胞、NCI-H820細胞
HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞
T24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22S細胞、MDA PCa 2b細胞、RGC5細胞
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關(guān)鍵字: NCI-H865 Cell:人肺癌細胞系
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