"CL-34 Cell:人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
McG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞
SK.MEL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain KB細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞、95-D細(xì)胞
SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞
SK.MEL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain KB細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞、95-D細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
CL-34 Cell:人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問(wèn)題:可以這樣說(shuō),對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開(kāi)始的幾代長(zhǎng)的還挺好的,可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題,可以非常肯定地說(shuō),你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是,細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒(méi)有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來(lái)對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱(chēng)之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類(lèi)盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開(kāi)始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對(duì)比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開(kāi)來(lái)的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步,對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒(méi)辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒(méi)必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來(lái)做比較,去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外,還有一個(gè)更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài),不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
MLE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞
H711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD-3細(xì)胞、SW 982細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞
MFD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC-4細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
CL-34 Cell:人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱(chēng)指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
A375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-153細(xì)胞、NH6細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞
IM-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW948細(xì)胞、CPA47細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞
GT1-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞、2B4細(xì)胞
Hs 636 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNG-M細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞、A-101D細(xì)胞
H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL細(xì)胞、NCI-H446細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞
NCIH1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888Lu細(xì)胞、LLC1細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞
H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞
CL-34 Cell:人結(jié)腸癌細(xì)胞系
HCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRMT-1細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞
KM12SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV90細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞、SW 948細(xì)胞
PF-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-102細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞
NCIH1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE85細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞
HMrSV5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL11細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞
MCF-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM6細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、MCF7-CTRL細(xì)胞
LNCaP C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB1細(xì)胞、HCE細(xì)胞、MAD109細(xì)胞
MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 45細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞
MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞
MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞
HCT 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1694細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞
FAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dunn LM8細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞
SK-ChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞
HS-294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-4細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
EPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059J細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞
Hs 294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 clone D1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞、CHL細(xì)胞
KU812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639V細(xì)胞、B35細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞
LWnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2195細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞
SKMES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞
KATO III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES 23.5細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞
JHH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354.T細(xì)胞、GM03190細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞
MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞
NCI-H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞
NUGC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL-2細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞
LC1-Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCI1細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞
CV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 1112SK細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞
NBLAN5T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KFB細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞、CEK細(xì)胞
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
BT-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H719細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞、Dami細(xì)胞
HIEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo-1細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞
TE 85 ClF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞
HEC-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB/ALL細(xì)胞、SW-982細(xì)胞、H226細(xì)胞
P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞
184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞
PC 61 5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1-E6E7細(xì)胞、ST2細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞
WM-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1944細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞
SU-DHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTA7細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞
SKG3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE29細(xì)胞、B-3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞
RKO-AS-45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC996細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞
3T3-442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-MeWo細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞
EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞
CL-34 Cell:人結(jié)腸癌細(xì)胞系
KOSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW42細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞
BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 19細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞、SCC25細(xì)胞
CAL 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK2細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞
PLB-985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞、KMH2細(xì)胞
M07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BS-C-1細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞
NBL-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CZ-1細(xì)胞、H-1395細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞
SDBMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hSCC-25細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞、VMM39細(xì)胞
Neukoplast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKF細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞
BHT-101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞
CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞、H740細(xì)胞
KLN-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞
GT38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOG細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞、H-1876細(xì)胞
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關(guān)鍵字: CL-34 Cell:人結(jié)腸癌細(xì)胞系
上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售與服務(wù)于一體的專(zhuān)業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團(tuán)隊(duì),提供超過(guò)100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶(hù)至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶(hù)。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢(shì)市場(chǎng)資源,以匠心服務(wù)廣大客戶(hù),我們可以為客戶(hù)提供Binsui、TCI等國(guó)內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿(mǎn)足客戶(hù)的試劑需求。