"PAMC82 Cell:人胃癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
NCIH1734細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞
SW 1353細胞系相關產(chǎn)品:Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞
D-407細胞系相關產(chǎn)品:HTR-8細胞、138 MG細胞、SNU1040細胞
HT3細胞系相關產(chǎn)品:FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PAMC82 Cell:人胃癌細胞系
細胞消化過程總結:其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
GA-10(Clone 4)細胞系相關產(chǎn)品:hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞
HSC-1細胞系相關產(chǎn)品:293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
CC-LP-I細胞系相關產(chǎn)品:MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞
QGY-7701細胞系相關產(chǎn)品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
ACHN細胞系相關產(chǎn)品:HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
PAMC82 Cell:人胃癌細胞系
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
Bat lung細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
H-747細胞系相關產(chǎn)品:HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
SP-2細胞系相關產(chǎn)品:FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
Microbiological Associates-104細胞系相關產(chǎn)品:HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞
SW-982細胞系相關產(chǎn)品:LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞
Nthy ori 3.1細胞系相關產(chǎn)品:SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞
D341細胞系相關產(chǎn)品:hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
PAMC82 Cell:人胃癌細胞系
MESSADX5細胞系相關產(chǎn)品:MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
U2OS細胞系相關產(chǎn)品:Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
TCMK-1細胞系相關產(chǎn)品:L-02細胞、LM1細胞、NCIH28細胞
HEL9217細胞系相關產(chǎn)品:Kato-III細胞、H1836細胞、TE 85.T細胞
KMM1細胞系相關產(chǎn)品:RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞
6-10B細胞系相關產(chǎn)品:SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
BC-PAP細胞系相關產(chǎn)品:NMCG-1細胞、QG56細胞、WM 239A細胞
CAL-39細胞系相關產(chǎn)品:B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
MCF/Adr細胞系相關產(chǎn)品:BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
MCF/Adr細胞系相關產(chǎn)品:BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
RH30SJ細胞系相關產(chǎn)品:End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞
639 V細胞系相關產(chǎn)品:CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞
V79-GalK1細胞系相關產(chǎn)品:GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞
SkChA1細胞系相關產(chǎn)品:REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
Hs706T細胞系相關產(chǎn)品:SR786細胞、JC細胞、Panc02細胞
BE(2)C細胞系相關產(chǎn)品:SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞
H820細胞系相關產(chǎn)品:CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞
Capan-1細胞系相關產(chǎn)品:COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞
HCC 2185細胞系相關產(chǎn)品:H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞
H1954細胞系相關產(chǎn)品:Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞
MADB 106細胞系相關產(chǎn)品:HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞
CNE1-LUC細胞系相關產(chǎn)品:TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞
CV-1 in Origin Simian-1細胞系相關產(chǎn)品:H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞
H446細胞系相關產(chǎn)品:SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
H1836細胞系相關產(chǎn)品:H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞
KE 37細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
LU451細胞系相關產(chǎn)品:J82 COT細胞、NCI-H1238細胞、MRC 5細胞
TE5細胞系相關產(chǎn)品:MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞
HCC-827細胞系相關產(chǎn)品:MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞
RL-952細胞系相關產(chǎn)品:B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
McArdle RH-7777細胞系相關產(chǎn)品:WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞
Lewis Lung細胞系相關產(chǎn)品:WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞
CHOS細胞系相關產(chǎn)品:MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞
U343細胞系相關產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
GM3190細胞系相關產(chǎn)品:RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞
SK-MEL-24細胞系相關產(chǎn)品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
COLO-320DM細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞
SLMT1細胞系相關產(chǎn)品:L 428細胞、SK-N-F1細胞、HEC-1-B細胞
MC57G細胞系相關產(chǎn)品:HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
ARO-81細胞系相關產(chǎn)品:CT-26細胞、RCC4細胞、SK-N-BE(1)細胞
H1792細胞系相關產(chǎn)品:IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
K562/ADP細胞系相關產(chǎn)品:SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
PAMC82 Cell:人胃癌細胞系
SUDHL6細胞系相關產(chǎn)品:H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
SiHa細胞系相關產(chǎn)品:SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
CCD-19Lu細胞系相關產(chǎn)品:HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞
MC 3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品:SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
VA-ES-BJ細胞系相關產(chǎn)品:SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞
Hela-Ap-1細胞系相關產(chǎn)品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
G-401細胞系相關產(chǎn)品:NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞
Hs 940.T細胞系相關產(chǎn)品:CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
MS751細胞系相關產(chǎn)品:INS1細胞、EJ 138細胞、HEK-293 c18細胞
NK92細胞系相關產(chǎn)品:HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
SK.OV.3細胞系相關產(chǎn)品:HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關產(chǎn)品:FU-97細胞、TT細胞、SK-OV-433細胞
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關鍵字: PAMC82 Cell:人胃癌細胞系
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