"KM12-SM Cell:人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：結(jié)腸癌
HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞
Dunn LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞
Colo205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KM12-SM Cell:人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SW1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞
NCIH2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞
PCI-SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1376細胞、DU-145細胞、DF1細胞
JM-Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK-1細胞、TE85細胞、Hs274T細胞
MSTO211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
細胞生長特性：貼壁
KM12-SM Cell:人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
MLA 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞
MGH-U3 (RN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞
Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞
GM07404A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞
HEK293-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞
NCI-H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞
KM12-SM Cell:人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細胞系
FRTL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞
HIEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞
H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
MDCC-MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
SN12PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞
Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞
b.End3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞
alpha-TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-527細胞、CTV-1細胞、SLK細胞
HTR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
BC3 H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-27細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、LAC細胞
CG4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞
OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
EU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞
K 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC 256細胞、RPMI2650細胞、H-1568細胞
P3.NS-1/1.Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB細胞、SKUT1細胞、B16F1細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
OVCA-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞
RCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
HT 1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞
TE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞
PVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞
MC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞
MC3T3E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc10.05細胞、RH7777細胞、UT7細胞
NOMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞
LC-1-sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH35細胞、P30OHK細胞、Panc_03_27細胞
NCIH1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H774細胞、BAR-T細胞、OVTOKO細胞
P3X63Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
NTHY-ORI3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞
Kit 225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
HCC-1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
RS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
BALB/3T3 cl. A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK-8細胞、HEK 293-F細胞、CTV-1細胞
HT1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞
AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
NHEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 435細胞、526 mel細胞、OCI-Ly 18細胞
UCW 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
Human Foreskin Fibroblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：STC-1細胞、LoMeT-ccRcc細胞、H-1882細胞
SK-MEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞
TE354T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞
KM12-SM Cell:人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細胞系
SKGIIIA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞
Porcine Kidney-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801C細胞、LS-1034細胞、8305C_1細胞
PA12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R-1059-D細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、EMT-6細胞
SW626細胞系相關(guān)產(chǎn)品：XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞
U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
NCI-H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sol8細胞、Colo-678細胞、H-2135細胞
A375-S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
HS852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞
NIE 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞
NL20SV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞
IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
TE5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-9D細胞、EBTr細胞、HCT_116細胞
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