"PA317 Cell:逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的NIH3T3細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：胚胎；成纖維細胞；NIH Swiss
hTERTHME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
H-2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
BxPC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-7666細胞、M 1細胞、H-345細胞
SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
PA317 Cell:逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的NIH3T3細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。１.不同的細胞，喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同，還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。２.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入３ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培養(yǎng)基，進行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞我們只吹打，不消化的）；其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。１０分鐘觀察一次，２０分鐘，３０分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入３ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。３.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。（可能也是競爭很大，有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。）對于生長速度快的細胞，易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。４.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞，在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài)，比玻璃瓶會好，對于生長速度慢的細胞，玻璃瓶則會更好。同樣，對于同一種細胞，在其生長速度慢的時候，會好一點，比如剛剛復(fù)蘇的時候，或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候，玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復(fù)蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞
細胞生長特性：貼壁
PA317 Cell:逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的NIH3T3細胞系
正確的細胞復(fù)蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SUM 159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
AM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞
PC.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞
Mono Mac6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞
NCI-SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
HCGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
PA317 Cell:逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的NIH3T3細胞系
HFT-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞
KYSE50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞
GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
LM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞
RASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞
HCC0044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
BC-023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞
EC-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRIF細胞、P3-X63Ag8.653細胞、SUDHL-1細胞
HEK.EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞
HEK.EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞
SVG(P12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞
MNNG-HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞
GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
SRA01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
NK-92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞
B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
SF-763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞
U266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1651細胞、TM4細胞、SU.86.86細胞
TYK-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
T-ALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
LU165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
MADB-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
BE2_C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH30細胞、HN4細胞、AE1201細胞
MDA-MB-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
WiDrTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
H-650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
JEG-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295R細胞、GM02131A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞
T24(ECV304)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞
H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞
COS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa14C細胞、H-1373細胞、YT細胞
MOLT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
IPLB-SF-21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
NCIH747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
Hs 746.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
Sol8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
SUDHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
PA317 Cell:逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的NIH3T3細胞系
HCT-FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
IPLB-SF-21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
OCIAML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞
138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞
HLF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
RN-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞
HDMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞
RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
L132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞
HCEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
Emory University-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME 180細胞、CCF-STTG1細胞、Tn-5B1-4細胞
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