"FO [Mouse myeloma] Cell:小鼠骨髓瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
Cor L88細胞系相關產品：NCI-H1573細胞、SW-900細胞、CV1細胞
C518細胞系相關產品：MES-SA/Dx-5細胞、SV40 MES 13細胞、HLE-SRA-01/04細胞
SCL1細胞系相關產品：NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞
MPC-83細胞系相關產品：PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
FO [Mouse myeloma] Cell:小鼠骨髓瘤細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
OCLY8細胞系相關產品：PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞
Hs 729細胞系相關產品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
Henrietta Lacks cells細胞系相關產品：IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞
RPMC細胞系相關產品：RA-FLSs細胞、NeHepLxHT細胞、H2286細胞
SW 579細胞系相關產品：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
FO [Mouse myeloma] Cell:小鼠骨髓瘤細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
NB-4細胞系相關產品：NCI-HUT-125細胞、HCC-1438細胞、HT clone H9細胞
DoTc2 4510細胞系相關產品：COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞
UM-UC-14細胞系相關產品：CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關產品：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
ESC-410細胞系相關產品：HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞
MES-13細胞系相關產品：OSK-1細胞、CTLL(2)細胞、Calu3細胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞系相關產品：THP 1細胞、IGR-OV1細胞、BHK-21細胞
FO [Mouse myeloma] Cell:小鼠骨髓瘤細胞系
HCC0095細胞系相關產品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
3T3-Swiss細胞系相關產品：SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞
HEK-293-FT細胞系相關產品：NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞
PaTu 8988 S細胞系相關產品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
SN12C-PM6細胞系相關產品：NBL-5細胞、SK-N-FI細胞、Strain KB細胞
Karpas422細胞系相關產品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
WM-239A細胞系相關產品：KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
HcaF細胞系相關產品：H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞
ML2細胞系相關產品：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞
ML2細胞系相關產品：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞
P116細胞系相關產品：MH-22a細胞、DMS 114細胞、CHP 126細胞
T-24細胞系相關產品：SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
WILL-2細胞系相關產品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
H1048細胞系相關產品：IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞
Clone 929細胞系相關產品：Mv1Lu細胞、HET1A細胞、N1E-115細胞
Jurkat E6-1細胞系相關產品：CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞
TR-146細胞系相關產品：MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
JAR細胞系相關產品：SkChA-1細胞、BL1339細胞、HEL-92.1.7細胞
HS578細胞系相關產品：CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
Hs729T細胞系相關產品：NIHOVCAR3細胞、EJ細胞、MDA361細胞
Walker-Ca.256細胞系相關產品：Tu 177細胞、WSU-DLCL(2)細胞、KNS42細胞
C-Lu-65細胞系相關產品：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
GP-293細胞系相關產品：Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞
OCM1A細胞系相關產品：686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
PANC 1005細胞系相關產品：BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞
NIE 115細胞系相關產品：B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞
LAN-6細胞系相關產品：H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞
HIBEC細胞系相關產品：NCI-BL1339細胞、DOK細胞、NG-108-15細胞
U251-MG細胞系相關產品：Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
MCF-7細胞系相關產品：MONO-MAC 6細胞、NCIH1436細胞、LS 513細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關產品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
MCA38細胞系相關產品：U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
KOSC-2 cl3-43細胞系相關產品：Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞
T24細胞系相關產品：KCL22S細胞、GA-10細胞、UCLA-RO 81細胞
H1819細胞系相關產品：HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞
HCC-2935細胞系相關產品：746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞
MES-SA細胞系相關產品：MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞
Co320細胞系相關產品：HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞
3T3 Swiss Albino細胞系相關產品：OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞
GM05372細胞系相關產品：J 774A.1細胞、HF-91細胞、FaDu細胞
NCIH2227細胞系相關產品：OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞
HSC-3細胞系相關產品：NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞
LN 229細胞系相關產品：RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞
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NCIH1417細胞系相關產品：SUP-T1細胞、E.L.4細胞、Panc 2.03細胞
SCCVII/St細胞系相關產品：Panc-327細胞、LNCaP-ATCC細胞、LS 180細胞
108CC15細胞系相關產品：OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞
H341細胞系相關產品：MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
Gejiu Lung Carcinoma-82細胞系相關產品：NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞
RPMI-1846細胞系相關產品：Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞
T-T細胞系相關產品：CWR22-Rv1細胞、32D clone3細胞、SBC-5細胞
Gejiu Lung Carcinoma-82細胞系相關產品：NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞
TE-85細胞系相關產品：Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
RM-1細胞系相關產品：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞
TGW細胞系相關產品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
COLO 741細胞系相關產品：NCI-H820細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NTera 2/cl.D1細胞
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關鍵字： FO [Mouse myeloma] Cell:小鼠骨髓瘤細胞系
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