"A-375 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：A３７５源自一位５４歲女性，是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在瓊脂上形成克隆。
LTEPa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞
SW 837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
HIEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞
HRC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A-375 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
細胞凍存基本方法：１．細胞：選對數(shù)生長期細胞，收集細胞２４小時前換液一次。２．計數(shù)：按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液，計數(shù)，令細胞密度達５×１０(６)/ml，離心去上清，吸入離心管中。３．凍存液：先用培養(yǎng)液９分＋DMSO １分（或甘油）配成１０％的DMSO凍存液，按上法一滴滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。４．分裝：分裝入無菌安剖中，每安剖加１.５毫升細胞懸液。５．封口：用塑料安剖時擰緊瓶口即可；如用火焰封閉安剖口后，仔細檢查，定要封嚴，必要時可浸入藍色液中觀察，為安全起見，把安剖縫入紗布小袋中，以防液氮浸入后，融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人；紗袋一端系以線繩，末端扎有小牌，注明：細胞名稱，凍存日期，以便日后查找。細胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
AR4-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
D283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL3細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、Det 562細胞
BHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEC細胞、I90細胞、H2085細胞
KY70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞
細胞生長特性：貼壁
A-375 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
OCIAML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞
Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
RIN-m細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞
NuTu 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
RBL2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：b.End3細胞、NCTC 929細胞、NCI-SNU-449細胞
U266S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1細胞、NCI-H2198細胞、SNU-449細胞
A-375 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
Hs 343.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TN5B14細胞、HKC細胞、V79-1細胞
HEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞
SW 1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞
Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞
A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞
U118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
NCIH64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
KHYG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞
KHYG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞
JCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞
HCC827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞
RMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞
H-838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞
LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞
SNU119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
RLE-6TN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
OCI-LY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞
FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞
SK-MEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞
BE2-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞
MDAMB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞
HDLM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞
HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞
HCMEC(BL12-H)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞
NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞
NCIH64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
ATDC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
NCI-H102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞
HSC-T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞
CCD-841-CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF (CF-1)細胞、LS513細胞、HCoEpiC細胞
PC 61.5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1 clone 6細胞、SK-MEL-MeWo細胞、U-251-MG細胞
H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞
DanG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：207細胞、TGW細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞
MA104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS-76細胞、MOLM16細胞、HSC1細胞
NCI-SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞
NTera-2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞
NCI-SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
PLA-801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞
YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
Vero細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞
A-375 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
Alexander cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
TC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞
PG-4 (S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SB細胞、MCF7細胞、COC1/CDDP細胞
Neuro2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞
U20-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞
GM03190A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
BHP-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞
MLMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞
COLO-829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
SCCVII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
Tregs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-3細胞、SKM-1細胞、HuT78細胞
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關(guān)鍵字： A-375 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
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