"BEL-7405 Cell:人肝癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
COLO 738細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
GM02219細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
SKRC 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
BEL-7405 Cell:人肝癌細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NG 108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
SNGM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞
HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
SUM52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-12細胞、NCIH2081細胞、NCI-H524細胞
細胞生長特性：貼壁
BEL-7405 Cell:人肝癌細胞系
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
NCI-H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞
THC-8307細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 123細胞、SW-403細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞
H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞
766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
Hs578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞
HCC0095細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
COS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa14C細胞、H-1373細胞、YT細胞
BEL-7405 Cell:人肝癌細胞系
LAPC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
TCMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-02細胞、LM1細胞、NCIH28細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
Oka-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞
SK MEL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 420細胞、AKR細胞、Case 3細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
H-1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
L132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞
L132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞
T-47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞
ACT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2-Ad細胞、SW1990細胞、H1688細胞
NCIH847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞
MDCK supertube細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
OCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV-1細胞、hTERTHME1細胞、CL-11細胞
RKO-AS45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞
HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
Rat 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞
J774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞
TU 686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
HS 445T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞
HCV 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞
SEG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
MDA-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS(TE85)細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、OC 316細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
SU-DHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞
H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞
NCI-H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞
Huh7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞
PCI:SG-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞
HRC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞
293 Ad5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MO59J細胞、639V細胞、NCIADR.RES細胞
NCI.H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞
95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞
LM TK negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞
HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
NTera 2/cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1155細胞、OVCAR432細胞、ssMCF-7細胞
138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞
G-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞
SNU638細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞
LNCaP-Clone-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1954細胞、3T6 Swiss Albino細胞、Tj-905細胞
KYSE 270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP92細胞、Hs739T細胞、G-361細胞
BEL-7405 Cell:人肝癌細胞系
BOWES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 24細胞、MDA 435細胞、3T3-A31細胞
MARC145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞
32D CL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞
NCI-H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
C8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
CTX TNA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
KU 19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
RA.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細胞、P3X63細胞、QG-56細胞
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