"Caco-2 Cell:人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:細(xì)胞株分離自一個(gè)原發(fā)性結(jié)腸癌。當(dāng)細(xì)胞長滿時(shí),表現(xiàn)出典型的腸細(xì)胞分化的特征。Caco-2細(xì)胞表達(dá)維生素A酸結(jié)合蛋白I和視黃醇結(jié)合蛋白II,角蛋白陽性。
KP-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES-2細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、P-19細(xì)胞
HMCB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞
SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞
JJN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DrG細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Caco-2 Cell:人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長的,尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞,單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以,消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài),這個(gè)啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè),因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到70%左右的時(shí)候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時(shí)候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多,還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn):傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時(shí)間,等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時(shí)間,不能時(shí)間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候,或者臨時(shí)沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Vero-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、KMS26細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞
ECC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、Z138細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞
D407 RPE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H508細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞、GM05384細(xì)胞
UMNSAH-DF 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOL1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞
TCam 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-HSR細(xì)胞、OCI-Ly 7細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
Caco-2 Cell:人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A7r5細(xì)胞、H-1355細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞
EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞
Mono Mac 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP-10細(xì)胞、KE 37細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞
L-1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cattle chondrocytes細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞、MJ細(xì)胞
Toledo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-361細(xì)胞、H-295細(xì)胞、KP4細(xì)胞
SNU251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 513細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞
Calu3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞
Caco-2 Cell:人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
C643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VCaP細(xì)胞、CL1細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞
LUDLU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9204細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞
SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A673細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞
FHCRC subclone 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞、ARO81細(xì)胞
KU 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9 (Hamprecht)細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞
C127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M 1細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞、TE6細(xì)胞
P3HR1-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞
SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-2細(xì)胞、MSC細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞
SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-2細(xì)胞、MSC細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞
H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞
M-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEEpiC細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞
KYSE520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞
NCI-H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E6-1細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞
HCoEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P36細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞
Hs 600.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95.8細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞、H1963細(xì)胞
OCILY19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB 1.19細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
DAN-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aNK細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞
PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2009細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞、CL11細(xì)胞
MCF-7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-Ca.256細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞
H283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 Bl細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞
SW 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18Co細(xì)胞、UMUC-14細(xì)胞、CAOV4細(xì)胞
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞
J-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293EBNA細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞
NCIH1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞
H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:He-La細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞、PT-67細(xì)胞
Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCLCD細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞
HCT-GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 126細(xì)胞、H460細(xì)胞、NALM6細(xì)胞
H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C-13細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞、KB細(xì)胞
Porcine Kidney-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1048細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞
UMRC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞
Tb1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞
SK-N-BE(1)n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細(xì)胞、H-2023細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞
H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞
Natural Killer-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL15細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞、H-865細(xì)胞
CAL148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs895T細(xì)胞、QG-56細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞
H4IIEC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞
Hep 3B2.1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞、BT-325細(xì)胞
RS(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞
BEL7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、CAL33細(xì)胞
G361mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 267細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞
KYSE-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE1細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞、BTT739細(xì)胞
Caco-2 Cell:人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
HCT-GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 126細(xì)胞、H460細(xì)胞、NALM6細(xì)胞
CAMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 51細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞、H929細(xì)胞
LS-123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 739.T細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞、H2330細(xì)胞
MAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH820細(xì)胞、TF1細(xì)胞、RBL細(xì)胞
Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞
LLC-MK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、PC3細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞
NIH3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE 37細(xì)胞、Hs294細(xì)胞、HCC38細(xì)胞
4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞
SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞
SHG 44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD-LM-2細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞
MC26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-274-T細(xì)胞、TW 01細(xì)胞、HC-11細(xì)胞
WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、H-2195細(xì)胞
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