"COLO 205 Cell:人結(jié)直腸腺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:該細胞系是1957年由T.U.Sample等從患有結(jié)腸癌的70歲男性白人的腹水中分離的。該病人在取腹水樣品前已用5-尿嘧啶治療4~6周。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性;產(chǎn)生CEA、IL10。
HCC-1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞
BC-025細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞
BN-CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞
HO1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
COLO 205 Cell:人結(jié)直腸腺癌細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDAMB134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
3T3NIH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞
Anip973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
BIC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
GOS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞
細胞生長特性:貼壁生長
COLO 205 Cell:人結(jié)直腸腺癌細胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞形態(tài)特性:上皮樣
CAL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞
RBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞
H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞
McA-RH 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞
QBI-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞
A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
NCI-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL12T細胞、GFP-Olig2細胞、MKN-7細胞
COLO 205 Cell:人結(jié)直腸腺癌細胞系
LN-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGCs細胞、786-0細胞、hSCC-25細胞
C-33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞
TE-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
Rat Fetal Lung-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 [Mouse]細胞、HUV-EC-C細胞、SK-MEL-2細胞
1.1B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
Hs 578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
H-865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞
FM88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞
FM88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞
HPB/ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞
ASH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞
WSU-HN13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞
HSC-T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞
HEK293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
D-324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-182細胞、HCT-116細胞、H2066細胞
EA.Hy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞
SKMES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞
UPCI-SCC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞
HT-1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞
H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞
KM.12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞
HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞
Hs 445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OP9細胞、TK.10細胞、H-1963細胞
MT-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
HCT GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞
H9c2(2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞
SUIT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞
NCI-H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞
C4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞
VA-ES-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
H-220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞
RGC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞
H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
K-1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞
KMM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞
MRAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2B細胞、LS-123細胞、RAMSCs細胞
Tu686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞
A2780S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞
Rat-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215A細胞、MDA231細胞、KU-812-F細胞
SUDHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞
COLO 205 Cell:人結(jié)直腸腺癌細胞系
B16F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞
Hs 281.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-DM細胞、NCM460細胞、ARH-77細胞
HCC 94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞
Tu-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞
CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
Roswell Park Memorial Institute 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC PRF 5細胞、HuT-102細胞、GM02219細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
BC-023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞
PLB 985細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞
TE 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
CAL-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
GM2132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 841 CoTr細胞、Sf21細胞、NOZAWA細胞
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