"NUGC-3 Cell:人胃癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
NCI-H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
MDCK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NUGC-3 Cell:人胃癌細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:6傳代
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TR 146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞
Leydig細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTSC-3細胞、BPH-1細胞、MC3T3-L1細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
BCAP37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞
細胞生長特性:貼壁生長
NUGC-3 Cell:人胃癌細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
D 407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞
RAT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞
MDA-MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞
OCI-Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞
BC3 H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-27細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、LAC細胞
HT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM35細胞、MIHA細胞、SNU1細胞
NUGC-3 Cell:人胃癌細胞系
L-WRN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞
NB19-RIKEN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞
D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞
RA 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞
NALM 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
M20 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞
8505C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
DI-TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
DI-TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
SKOV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 3細胞、MADB-106細胞、G-292細胞
D562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞
H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞
RPMI 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞
H-2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞
CHL-IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞
EoL-1 cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
A375-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
WM115-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞
SV-HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞
CEM.C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:10RGB細胞、NCIH23細胞、MN-9D細胞
NCI-N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞
RMS13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞
AX-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞
ketr 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞
SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞
SUDHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞
RMS 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞
HEC1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞
A-2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞
PC-9/S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞
DOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞
B-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞
HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞
AML-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞
HOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT(H9)細胞、GDM1細胞、EA. hy 926細胞
RPMI8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TERT-RPE1細胞、PLA801-95C細胞、LIPF178C細胞
RPMI8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TERT-RPE1細胞、PLA801-95C細胞、LIPF178C細胞
CWR22Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞
LS-174細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞
NUGC-3 Cell:人胃癌細胞系
HSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
TF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang liver細胞、Alexander cells細胞、hTERT RPE1細胞
P3J HR1-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-101D細胞、HCC1008細胞、NCIH1563細胞
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
Hs852細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞
HuO9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
SCL-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
SACC83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSCs(mBMSCs)細胞、MLMA細胞、SF17細胞
T. T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞
IALM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞
SLMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、SNU1細胞、BV173細胞
Hs 852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR 983F細胞、RD 2細胞、CEM-CCRF細胞
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