"VMRC-LCD Cell:人肺癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
C17.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 138 MG細(xì)胞、Eca109細(xì)胞、U266S細(xì)胞
SK-MEL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HemECs細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞、SW 403細(xì)胞
Eca 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910/PM細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、SNU869細(xì)胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHEE細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
VMRC-LCD Cell:人肺癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存：目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞
NRCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fu97細(xì)胞、8505C細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞
MEL-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tj-905細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞、WILL2細(xì)胞
BEL 7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細(xì)胞、SW403細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
MKN-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 1598細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
VMRC-LCD Cell:人肺癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
NCIH1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-451Lu細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞
H-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190細(xì)胞、HT1197細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞
NCI660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：87 MG細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞
32D/cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E-C3細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞、EM-3細(xì)胞
LN382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526mel細(xì)胞、PL5細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞
RKOE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190PT細(xì)胞、BCECs細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞
Functional Liver Cell-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OK-WT細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞
VMRC-LCD Cell:人肺癌腺癌細(xì)胞系
COLO679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EPC細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞、SCH細(xì)胞
NCIH2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：74Int細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞
SHG 44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD-LM-2細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞
ELD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP-1細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞、BT-483細(xì)胞
NKL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞
3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag 4/1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞
SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞
NCI-ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞、WEHI164細(xì)胞
RPMI-1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940.T細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞
RPMI-1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940.T細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞
Molm 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-cloneD1細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞
CL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、HL7702細(xì)胞
HSC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-2B4細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞
SKRC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1155細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞
H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-100細(xì)胞、PC 61細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞
H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAKIKI Clone 1細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞、CACO2細(xì)胞
LL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細(xì)胞、HL-60細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞
DMS53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca-Ski細(xì)胞、L428細(xì)胞、H1836細(xì)胞
SW780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-21G細(xì)胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Vero E6細(xì)胞
RAW264細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYK-nu細(xì)胞、CD18細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞
SP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FBHE細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞
SVG p12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1688細(xì)胞、HEP3B2細(xì)胞、CAL78細(xì)胞
Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞
JB6 [Mouse]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK49F細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞、ST-2細(xì)胞
THP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞
H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 2細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞
PTK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIII細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞
NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞
Keio University-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞
Hs 636.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO-27細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞、PAa細(xì)胞
KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
Panc_08_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112CoN細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞
Ca-Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM1215細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞、L-1210細(xì)胞
UWB1.289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：118MG細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞
B16/BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞
BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞
CT26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-EMC-SS細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞、H-526細(xì)胞
SUM 159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132細(xì)胞、TE-5細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞
LM(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0015細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞
C2-C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AQ-Mel細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞
CAL85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞
VMRC-LCD Cell:人肺癌腺癌細(xì)胞系
NCI-H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 6細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞
Hs611T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞
GM03569D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211H細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞
FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞
COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞
BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞
NT2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GAK細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞、D10細(xì)胞
OACP4 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1581細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞、MOLT4細(xì)胞
KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7405細(xì)胞、BC-021細(xì)胞、TE-7細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
HOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98 G細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞、SW962細(xì)胞
BMU-S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco 2細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞
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