"SVEC4-10 Cell:小鼠淋巴結(jié)血管上皮樣細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
SW480E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SVEC4-10 Cell:小鼠淋巴結(jié)血管上皮樣細胞系
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
FOXNY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
HT55細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞
HCC2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞
L929(NCTC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
TE5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
SVEC4-10 Cell:小鼠淋巴結(jié)血管上皮樣細胞系
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
Tca8113細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695T細胞、SUDHL-5細胞、Tu-212細胞
BHP10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞
3T3 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞
Panc08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞
Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞
MT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
SVEC4-10 Cell:小鼠淋巴結(jié)血管上皮樣細胞系
HCC-9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞
H-209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
Medical Research Council cell strain-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH441細胞、T24(ECV304)細胞、H4-II-E-C3細胞
RPPVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞
MOLT16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞
OVCAR 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞
SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
Hs852T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA871細胞、NCI-H1573細胞、KTA-7細胞
Hs 888.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
SF 763細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞
H-1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞
Hs-729-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞
Natural Killer-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞
RN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞
BT.549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1755細胞、KU19-19細胞、DV90細胞
WM 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-OV-1細胞、N-2a細胞、BT325細胞
NIH:OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞
NCIH508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞
HUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
NCI H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
HPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞
Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞
NCI-H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
MH7A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOK細胞、BHP-10細胞、H1793細胞
SKHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
Kit 225 K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1385細胞、251 MG細胞、VMM5細胞
SK-ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
TE 85.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
MAVER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
GM06141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞
PIG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞
KU-812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞
Hs343T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon 26細胞、HPDLF細胞、FAO-1細胞
NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞
LLC-PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞
OCI-AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞
Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
SVEC4-10 Cell:小鼠淋巴結(jié)血管上皮樣細胞系
A2780/CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375SM細胞、SNU-16細胞、alpha TC1-6細胞
HuLEC-5a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
KPL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
KMST6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞
CORL105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、MDA-MB 361細胞
PLA801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞
Det. 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
H-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞
IBRS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis Lung Cancer細胞、OV2008細胞、NCIH1092細胞
Z-138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
SW-837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR-1細胞、HuT-78細胞、NCI-H460細胞
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