"BRL-3A Cell:大鼠正常肝細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
BT 325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCaP-37細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞
TCC-SUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2/D1細(xì)胞、COLO824細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞
CHP-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM-1細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞
H-2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Soleus clone 8細(xì)胞、RL-952細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
BRL-3A Cell:大鼠正常肝細(xì)胞系
細(xì)胞消化過程總結(jié):其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HRPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQ-P1細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeWo細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞、H-520細(xì)胞
HCC1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、NL-20細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞
VP303細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞
P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
BRL-3A Cell:大鼠正常肝細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
HCC941122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1963細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、H-1793細(xì)胞
NCI-H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW962細(xì)胞、2B4細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞
WSU-DLCL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞
P3 NS1 Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 706.T細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞
H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676細(xì)胞、L cells細(xì)胞、EL 4細(xì)胞
293-GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG 44細(xì)胞、SKES1細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞
SUM159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH-82細(xì)胞、GM02132C細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞
BRL-3A Cell:大鼠正常肝細(xì)胞系
NCI-H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL-68細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞、KHYG細(xì)胞
ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞
NCIH1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 1034細(xì)胞、IEC18細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞
7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4-1st細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞
SK-RC-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LoMeT-ccRcc細(xì)胞、U87細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞
MT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
Hs819T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766-T細(xì)胞、U2OS細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞
RPMI 1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞
MESSA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞、MEG01細(xì)胞
MESSA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞、MEG01細(xì)胞
FOX-NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-875細(xì)胞、C8161細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞
P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞
3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cells細(xì)胞、alpha TC1-6細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞
G 401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9細(xì)胞、HO8910細(xì)胞、HEB細(xì)胞
SF-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGSMC細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞
NTERA-2cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHBE細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞
M-07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞
RC-4B/C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-948細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞
SUM149-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-LM3細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞
BRL-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-6細(xì)胞、Hi5細(xì)胞、KM.12細(xì)胞
NCI-H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞
H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞
HCC 94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624mel細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞
MGH-UI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞
HFTF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞
U-87MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞
LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞
SKG-3a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞
NW38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1648細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞
UPCI:SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞
LA-795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR 8383細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞、DHL6細(xì)胞
LA4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA-1細(xì)胞、NS1細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞
SP2-0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-81細(xì)胞、Toledo細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞
MDA MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y-R細(xì)胞、MX1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞
T98-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-28細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞
JB-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞
QGY7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat77細(xì)胞、PK-15細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞
SMA 560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II細(xì)胞、H2444細(xì)胞、I90細(xì)胞
HMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780CP細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞、KU.812細(xì)胞
NCI-SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-02-03細(xì)胞、Madison細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞
DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1184細(xì)胞、UPCI:SCC090細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞
HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞
BRL-3A Cell:大鼠正常肝細(xì)胞系
MSTO-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-748細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞
H-865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5細(xì)胞、A20細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞
DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞
H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞
3D4/21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞
OCI/AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞
A-673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2085細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞
HEY A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細(xì)胞、H-2198細(xì)胞、CMK細(xì)胞
MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC-133細(xì)胞、COLO201細(xì)胞、A-2780細(xì)胞
Neukoplast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKF細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞
LM(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞
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