"VM-CUB-1 Cell:人膀胱癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞
U251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
RL95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
VM-CUB-1 Cell:人膀胱癌細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
786-O RCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
VM-CUB-1 Cell:人膀胱癌細胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
MH-22a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
CAL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞
MOLM-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
3T3 J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Henrietta Lacks cells細胞、RPMI 8402細胞、G-401細胞
FU-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
293S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
VM-CUB-1 Cell:人膀胱癌細胞系
PC-3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞
HMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
HepG2-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
CCD1112Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1RGB細胞、BL6細胞、MV-4:11細胞
S16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞
TCam 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-HSR細胞、OCI-Ly 7細胞、LNT-229細胞
H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞
Y3Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞
293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞
293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞
JHH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
Hs852T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA871細胞、NCI-H1573細胞、KTA-7細胞
VM Cub 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
IPLB-SF-21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
OVCA420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞
AR4-IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞
University of Arizona Cell Culture-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞
OVTOKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
GM04154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞
NCI H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞
YD15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞
COV-362細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞
U-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
SKG-IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞
GM07404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
PANC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHAGOK1細胞、NCI-H510A細胞、H-EMC-SS細胞
SKG-IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞
SUM 159細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞
D341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞
EJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL2細胞、OVCA 433細胞、SW-1463細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-428細胞、VM-CUB-I細胞、FRTL 5細胞
C8-D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞
OCI AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞
Ca9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C643細胞、MV-4-11細胞、NCIH128細胞
GM00215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞
TE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞
MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly3細胞、HBVSMC細胞、OPM-2細胞
R 2 C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
CHP-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT 3細胞、CCC-HIE-2細胞、HOC1細胞
H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞
Dunn LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs(mBMSCs)細胞
VM-CUB-1 Cell:人膀胱癌細胞系
AMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞
D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
HTh 74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞
NCIH2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞
X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H187細胞、SW 1783細胞、H1930細胞
NCI-H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞
C57/B6-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs611T細胞、CCD-112CoN細胞、P3 88 D1細胞
B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLTC-1細胞、HT 29細胞、OVCAR-3細胞
MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞
NCI-H1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞
ME16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H250細胞、CWR22-R1細胞、PC-9細胞
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